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EZmax for One-Step 單片段無縫克隆

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更新時間:2023-04-26 14:05:05瀏覽次數(shù):460

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
EZmax for One-Step 單片段無縫克隆是將 PCR 反應用到的超保真 P6 DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及穩(wěn)定劑以 2倍的終濃度進行混合。

詳細介紹

EZmax for One-Step  單片段無縫克隆

產(chǎn)品簡介

ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse TranscriptaseRTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的

適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT

EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針

qPCR,可進行基因表達的高效分析。

EZmax for One-Step  單片段無縫克隆

適用范圍

高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。

產(chǎn)品組成

組分

22105-01

RNase-free ddH2O

2 × 1 mL

5 × ToloScript qRT EasyMixa

400 μL

5 × No RT Control Mixb

EZmax for One-Step  單片段無縫克隆

保存條件

-20 ℃儲存。

質量控制

純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸外切酶、核酸內切酶及 RNase 殘留。

功能檢測:以 1 µg HeLa 細胞總 RNA 為模板進行逆轉錄反應,通過 qPCR 檢測 4 個基因的表達量,Ct 值在批次間產(chǎn)

品中基本相同。在 1 µg HeLa 細胞總 RNA 中混入 100 ng gDNA,經(jīng) 2-Step gDNA Erase-Out Mix 處理后加入 No

RT Control Mix,然后進行 qRT-PCR,獲得的 Ct >40

實驗流程

1. 配制逆轉錄反應體系

RNase-free 的離心管中配置如下體系,用移液器輕輕吹打混勻。

5 × ToloScript qRT EasyMix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

RT EasyMix for qPCR  

No RT Control 反應(可選)

No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。

RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。

5 × No RT Control Mix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

2. 進行逆轉錄反應

37 ℃*

15 min

85 ℃

5 sec

產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后

凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。

注意事項

1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短

暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。

2. 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以

多加入 5 µg Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。

3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。

產(chǎn)品簡介

ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse TranscriptaseRTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的

適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT

EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針

qPCR,可進行基因表達的高效分析。

適用范圍

高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。

產(chǎn)品組成

組分

22105-01

RNase-free ddH2O

2 × 1 mL

5 × ToloScript qRT EasyMixa

400 μL

5 × No RT Control Mixb

保存條件

-20 ℃儲存。

質量控制

純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸外切酶、核酸內切酶及 RNase 殘留。

功能檢測:以 1 µg HeLa 細胞總 RNA 為模板進行逆轉錄反應,通過 qPCR 檢測 4 個基因的表達量,Ct 值在批次間產(chǎn)

品中基本相同。在 1 µg HeLa 細胞總 RNA 中混入 100 ng gDNA,經(jīng) 2-Step gDNA Erase-Out Mix 處理后加入 No

RT Control Mix,然后進行 qRT-PCR,獲得的 Ct >40

實驗流程

1. 配制逆轉錄反應體系

RNase-free 的離心管中配置如下體系,用移液器輕輕吹打混勻。

5 × ToloScript qRT EasyMix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

RT EasyMix for qPCR  

No RT Control 反應(可選)

No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。

RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。

5 × No RT Control Mix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

2. 進行逆轉錄反應

37 ℃*

15 min

85 ℃

5 sec

產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后

凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。

注意事項

1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短

暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。

2. 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以

多加入 5 µg Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。

3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。

RT EasyMix for qPCR  

No RT Control 反應(可選)

No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。

RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。

5 × No RT Control Mix

4 µL

模版 RNA

Total RNA 1 pg-1 μg

RNase-free ddH2O

to 20 µL

2. 進行逆轉錄反應

37 ℃*

15 min

85 ℃

5 sec

產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后

凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。

注意事項

1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短

暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。

2. 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以

多加入 5 µg Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。

3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。

產(chǎn)品簡介

ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse TranscriptaseRTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的

適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT

EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針

qPCR,可進行基因表達的高效分析。

適用范圍

高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。

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組分

22105-01

RNase-free ddH2O

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