詳細介紹
EZmax for One-Step 單片段無縫克隆
產(chǎn)品簡介
ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse Transcriptase(RTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的
適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT
EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針
法 qPCR,可進行基因表達的高效分析。
EZmax for One-Step 單片段無縫克隆
適用范圍
高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。
產(chǎn)品組成
組分
22105-01
RNase-free ddH2O
2 × 1 mL
5 × ToloScript qRT EasyMixa
400 μL
5 × No RT Control Mixb
EZmax for One-Step 單片段無縫克隆
保存條件
-20 ℃儲存。
質量控制
純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸外切酶、核酸內切酶及 RNase 殘留。
功能檢測:以 1 µg HeLa 細胞總 RNA 為模板進行逆轉錄反應,通過 qPCR 檢測 4 個基因的表達量,Ct 值在批次間產(chǎn)
品中基本相同。在 1 µg HeLa 細胞總 RNA 中混入 100 ng 人 gDNA,經(jīng) 2-Step gDNA Erase-Out Mix 處理后加入 No
RT Control Mix,然后進行 qRT-PCR,獲得的 Ct 值>40。
實驗流程
1. 配制逆轉錄反應體系
在 RNase-free 的離心管中配置如下體系,用移液器輕輕吹打混勻。
5 × ToloScript qRT EasyMix
4 µL
模版 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
RNase-free ddH2O
to 20 µL
RT EasyMix for qPCR
No RT Control 反應(可選)
No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。
在 RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。
5 × No RT Control Mix
4 µL
模版 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
RNase-free ddH2O
to 20 µL
2. 進行逆轉錄反應
37 ℃*
15 min
85 ℃
5 sec
產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后
凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。
注意事項
1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 及 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短
暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。
2. 在 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg 的 Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以
多加入 5 µg 的 Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。
3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。
產(chǎn)品簡介
ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse Transcriptase(RTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的
適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT
EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針
法 qPCR,可進行基因表達的高效分析。
適用范圍
高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。
產(chǎn)品組成
組分
22105-01
RNase-free ddH2O
2 × 1 mL
5 × ToloScript qRT EasyMixa
400 μL
5 × No RT Control Mixb
保存條件
-20 ℃儲存。
質量控制
純度檢測:所有組分經(jīng)檢測均無核酸外切酶、核酸內切酶及 RNase 殘留。
功能檢測:以 1 µg HeLa 細胞總 RNA 為模板進行逆轉錄反應,通過 qPCR 檢測 4 個基因的表達量,Ct 值在批次間產(chǎn)
品中基本相同。在 1 µg HeLa 細胞總 RNA 中混入 100 ng 人 gDNA,經(jīng) 2-Step gDNA Erase-Out Mix 處理后加入 No
RT Control Mix,然后進行 qRT-PCR,獲得的 Ct 值>40。
實驗流程
1. 配制逆轉錄反應體系
在 RNase-free 的離心管中配置如下體系,用移液器輕輕吹打混勻。
5 × ToloScript qRT EasyMix
4 µL
模版 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
RNase-free ddH2O
to 20 µL
RT EasyMix for qPCR
No RT Control 反應(可選)
No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。
在 RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。
5 × No RT Control Mix
4 µL
模版 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
RNase-free ddH2O
to 20 µL
2. 進行逆轉錄反應
37 ℃*
15 min
85 ℃
5 sec
產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后
凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。
注意事項
1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 及 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短
暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。
2. 在 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg 的 Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以
多加入 5 µg 的 Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。
3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。
RT EasyMix for qPCR
No RT Control 反應(可選)
No RT Control 是指不加逆轉錄酶的陰性對照反應,用于檢驗 RNA 模板中是否有 gDNA 殘留。
在 RNase-free 離心管中配制如下混合液,用移液器輕輕吹打混勻。
5 × No RT Control Mix
4 µL
模版 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
RNase-free ddH2O
to 20 µL
2. 進行逆轉錄反應
37 ℃*
15 min
85 ℃
5 sec
產(chǎn)物可立即用于 qPCR 反應,或凍存于-20℃,并在半年內使用;如需長期存放,則建議將反轉錄 cDNA 產(chǎn)物分裝后
凍存于-80 ℃。cDNA 應避免反復凍融。
注意事項
1. 由于 5 × ToloScript qRT EasyMix 及 5 × No RT Control Mix 中均含有高濃度的甘油,所以在使用前請短
暫離心,并輕彈(或用移液槍輕輕吸打混勻)后,準確吸取。
2. 在 20 µL 逆轉錄反應體系中建議加入不超過 1 µg 的 Total RNA。若目的基因的表達量非常低,則可以
多加入 5 µg 的 Total RNA;否則,如果加入 RNA 量過高,可能會超出后續(xù) qPCR 的線性范圍。
3. 本試劑盒制備的 cDNA 產(chǎn)物僅適用于 qPCR 反應,不適用于進行長片段目的基因的 PCR 擴增。
產(chǎn)品簡介
ToloScript RT EasyMix for qPCR 包含新一代逆轉錄酶 ToloScript Reverse Transcriptase(RTase)和針對逆轉錄優(yōu)化的
適緩沖液,進一步提高了 cDNA 合成的效率,適用于兩步法 qRT-PCR 檢測。試劑盒中的 5 × ToloScript qRT
EasyMix 含有逆轉錄反應所需的所有組分,加入模板 RNA 和水即可迅速進行反應。逆轉錄產(chǎn)物兼容染料法與探針
法 qPCR,可進行基因表達的高效分析。
適用范圍
高拷貝、低拷貝靶標基因轉錄水平的檢測,與 qPCR 聯(lián)用。
產(chǎn)品組成
組分
22105-01
RNase-free ddH2O