產(chǎn)品簡介
RIPA裂解液( 弱)是一種傳統(tǒng)的組織以及細胞快速裂解液,主要用于從動物組織和哺乳動物細胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細胞和懸浮細胞。
詳細介紹
RIPA裂解液( 弱) | ||||||||
RIPA Lysis Buffer | ||||||||
Cat No:DY7021 | ||||||||
Size:100ml | ||||||||
產(chǎn)品組分 | ||||||||
組分 Contents | LY7021 | |||||||
RIPA裂解液 | 100ml | |||||||
儲運條件 | ||||||||
4℃保存。 | ||||||||
說 明 | ||||||||
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途。 | ||||||||
產(chǎn)品簡介 | ||||||||
RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細胞快速裂解液,主要用于從動物組織和哺乳動物細胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細胞和懸浮細胞。按照其裂解液的強度可以分為強、中、弱三類,具體特點和差異請參考附表2,可根據(jù)實驗需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。經(jīng)RIPA裂解液(弱)提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western、IP等,特別適合于CO-IP檢測。 RIPA裂解液裂解RIPA裂解液(弱)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.25% sodium deoxycholate,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,可以有效抑制蛋白降解。 | ||||||||
實驗前準備及注意事項 | ||||||||
1.為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進行。 | ||||||||
2.使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品,可采用BCA法進行蛋白定量,以測定蛋白濃度。產(chǎn)品可單獨向本公司訂購,如:LY7052 BCA蛋白定量試劑盒。本品含有高濃度的去垢劑,不能用Bradford法進行蛋白定量。 | ||||||||
3.建議在使用RIPA裂解液前,向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,以防止蛋白降解,或保持蛋白的磷酸化狀態(tài)。產(chǎn)品可單獨向本公司訂購,如:LY7150 蛋白酶抑制劑混合物,LY7151 磷酸酶抑制劑混合物。 | ||||||||
4.若需獲得更高濃度的蛋白,應(yīng)減少哺乳動物蛋白抽提試劑的使用量。 | ||||||||
5. 對于培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞,推薦先使用常規(guī)方法消化細胞,再參考懸浮細胞蛋白提取步驟操作。 | ||||||||
6.對于離心獲得的細胞,若不確定細胞體積,可根據(jù)細胞數(shù)量計算RIPA裂解液的使用量。如5×106個Hela細胞約需加入500 μl RIPA裂解液,以此類推。 |
RIPA裂解液( 弱) | ||||||||
RIPA Lysis Buffer | ||||||||
Cat No:LY7021 | ||||||||
Size:100ml | ||||||||
產(chǎn)品組分 | ||||||||
組分 Contents | LY7021 | |||||||
RIPA裂解液 | 100ml | |||||||
儲運條件 | ||||||||
4℃保存。 | ||||||||
說 明 | ||||||||
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途。 | ||||||||
產(chǎn)品簡介 | ||||||||
RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細胞快速裂解液,主要用于從動物組織和哺乳動物細胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細胞和懸浮細胞。按照其裂解液的強度可以分為強、中、弱三類,具體特點和差異請參考附表2,可根據(jù)實驗需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。經(jīng)RIPA裂解液(弱)提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western、IP等,特別適合于CO-IP檢測。 RIPA裂解液裂解RIPA裂解液(弱)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.25% sodium deoxycholate,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,可以有效抑制蛋白降解。 | ||||||||
實驗前準備及注意事項 | ||||||||
1.為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進行。 | ||||||||
2.使用RIPA裂解液得到的蛋白樣品,可采用BCA法進行蛋白定量,以測定蛋白濃度。產(chǎn)品可單獨向本公司訂購,如:LY7052 BCA蛋白定量試劑盒。本品含有高濃度的去垢劑,不能用Bradford法進行蛋白定量。 | ||||||||
3.建議在使用RIPA裂解液前,向溶液中加入蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,以防止蛋白降解,或保持蛋白的磷酸化狀態(tài)。產(chǎn)品可單獨向本公司訂購,如:LY7150 蛋白酶抑制劑混合物,LY7151 磷酸酶抑制劑混合物。 | ||||||||
4.若需獲得更高濃度的蛋白,應(yīng)減少哺乳動物蛋白抽提試劑的使用量。 | ||||||||
5. 對于培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞,推薦先使用常規(guī)方法消化細胞,再參考懸浮細胞蛋白提取步驟操作。 | ||||||||
6.對于離心獲得的細胞,若不確定細胞體積,可根據(jù)細胞數(shù)量計算RIPA裂解液的使用量。如5×106個Hela細胞約需加入500 μl RIPA裂解液,以此類推。 |
表2 蛋白裂解液性能、參數(shù)比較 | ||||||||
目錄號 | LY7001 | LY7020 | LY7021 | |||||
產(chǎn)品名稱 | RIPA裂解液(強) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) | |||||
有效裂解成分 | 1%Triton X-100, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.5% sodium deoxycholate, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.25% sodium deoxycholate | |||||
裂解強度 | 強 | 中 | 溫和 | |||||
膜蛋白提取 | 很好 | 較好 | 一般 | |||||
胞漿蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | |||||
核蛋白提取 | 很好 | 較好 | 較好 | |||||
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,CO-IP |