產(chǎn)品簡介
包涵體蛋白溶解液:提取包涵體蛋白,可增加包涵體蛋白的溶解性,提高包涵體蛋白的提取效率,變性劑可通過透析去除。
詳細(xì)介紹
InclusionbodyDenatureReagent | ||||||||
Cat No:DY7007 | ||||||||
Size:100ml | ||||||||
產(chǎn)品組分 | ||||||||
組分 Contents | DY7007 | |||||||
包涵體蛋白溶解液 | 100 ml | |||||||
儲運(yùn)條件 | ||||||||
2 - 8 ℃ 保存。 | ||||||||
說 明 | ||||||||
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途。 | ||||||||
產(chǎn)品簡介 | ||||||||
包涵體是重組蛋白因為過度表達(dá)、蛋白無足夠時間進(jìn)行肽鏈折疊,部分折疊中間態(tài)之間的特異性錯誤聚合形成的一種不溶性結(jié)構(gòu)。這些基因表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列雖然正確,而其立體結(jié)構(gòu)是錯誤的,因此一般沒有生物活性。包涵體一般含有 50%以上的重組蛋白,其余為外源蛋白、核糖體元件、RNA 聚合酶、內(nèi)毒素、外膜蛋白 ompC、ompF 和 ompA 等、核酸(環(huán)狀或缺口的質(zhì)粒 DNA),以及脂體、脂多糖等,無定形,呈非水溶性,只溶于變性劑如尿素、鹽酸胍等。 使用本產(chǎn)品提取包涵體蛋白,可增加包涵體蛋白的溶解性,提高包涵體蛋白的提取效率,變性劑可通過透析去除。 | ||||||||
實驗前準(zhǔn)備及注意事項 | ||||||||
1.本試劑含有變性劑,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。 | ||||||||
2. 在低于4℃的保存溫度下易出現(xiàn)絮狀沉淀,使用時恢復(fù)至室溫,絮狀沉淀溶解后即可進(jìn)行后續(xù)步驟。 | ||||||||
操作步驟 | ||||||||
1. 用細(xì)菌裂解液或其他方法裂解菌液后提純包涵體。 | ||||||||
2. 1g 包涵體濕重中加入8ml 包涵體蛋白溶解液(粗略估算包涵體濕重)。 | ||||||||
3. 加入溶解液后混勻,振搖孵育 30 min。 | ||||||||
4. 離心去除細(xì)胞碎片。 | ||||||||
5. 收集上清液,進(jìn)行后續(xù)步驟測試。 |