詳細(xì)介紹
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
產(chǎn)品名稱 | N-AChR elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat nicotinic acetylcholine receptor, N-AChR Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
溴化代酰膽ACETYLTHIOCHOLINEBROMIDE(RG)度:≥98% CBP(CREB-bindingprotein
(含穩(wěn)定環(huán))BenzylBromide(stabilizedwithPropyleneOxide)>98.0%(GC)度:≥98% CBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原
(含穩(wěn)定環(huán))BenzylBromide(stabilizedwithPropyleneOxide)>98.0%(GC)度:≥98% CBX5(ChromoboxHomolog5
(含穩(wěn)定環(huán))BenzylBromide(stabilizedwithPropyleneOxide)>98.0%(GC)度:≥98% CC16(Claracellprotein16
溴酚藍(lán)BromophenolBlue度:≥98% CCK8(Cholecystokinin-8
溴酚藍(lán)BromophenolBlue度:≥98% CCL1/TCA3/I-309嗜粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原
溴酚紅BromophenolRed>80.0%(LC)度:≥98% CCL12/MCP-5(C-Cmotifchemokine12
溴酚紅BromophenolRed>80.0%(LC)度:≥98% CCL14/HCC-1(C-Cmotifchemokine14
土荊皮;PseudolaricAcCAS號(hào):82508314規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
塔拉薩敏;TalatisamineCAS號(hào):規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
天麻素;GastrodinCAS號(hào):62499278規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
甜菊糖;SteviosideCAS號(hào):57817897規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
特女貞苷;SpecnuezhenideCAS號(hào):39011922規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
β蛻皮激素;HydroxyecdysoCAS號(hào):5289747規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
1脫野尻霉素;1DeoxynojiCAS號(hào):19130962規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
他克莫司;TacrolimusCAS號(hào):104987113規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
10脫酰巴卡III;10DeaCAS號(hào):32981865規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
蛇床;LupulonCAS號(hào):468280規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
山梔子苷B;GardenosideCAS號(hào):24512627規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
商陸皂苷;EsculentosideCAS號(hào):規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
絲石竹皂苷元3OBD葡萄糖醛CAS號(hào):96553025規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
L鼠李糖;L(+)RhamnoseCAS號(hào):10030850規(guī)格:100mg訂購(gòu)|咨詢
松香;AbieticAcidCAS號(hào):514103規(guī)格:20mg訂購(gòu)|咨詢
N-AChR elisa試劑盒胰腺癌細(xì)胞,PANC05.04細(xì)胞β-Defensins細(xì)胞株96T進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)原裝、分裝進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)2gCAS號(hào):隱丹參酮 0.2mlELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine Receptor 2C (HTR2C)CLIA Kit for Caspase 14 (CASP14)94487-74-896T血管生成素2(ANG-2)Polyclonal AntibodyHPLC≥98%血纖肽/纖維蛋白肽B檢測(cè)試盒20mgβ-DF9001-32-5高化學(xué)試肌間蛋白3(MYOM3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)原裝、分裝進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)100mgCAS號(hào):隱綠原(4-咖??鼘帲?0.2mlELISA Kit for Adrenomedullin Receptor (AMR)CLIA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1)66056-22-296T血管緊張素1(Angiotensin-1)CLIA試盒HPLC≥98%血纖肽/纖維蛋白肽A檢測(cè)試盒20mgHBD-19001-32-5高化學(xué)試羧酯酶4A(CES4A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)94487-74-896T血管生成素2(ANG-2)Polyclonal Antibody