詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7631 |
細(xì)胞簡介:
小鼠棕色脂肪分離自棕色脂肪組織;動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負(fù)責(zé)儲存多余熱量;棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點(diǎn)是組織中有豐富的毛細(xì)血管,脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細(xì)胞中央,這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。最終,動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色(棕色)脂肪細(xì)胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達(dá)到,此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細(xì)胞,在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠棕色脂肪采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠棕色脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
愈創(chuàng)木酚 50g
Guaiacol 100g
鹽酸胍 100g
GuanidineHydrochloride 500g
魚脫酶2(DIO2)ELISA試劑盒 ELISA 組裝/原裝
Human ai IgM aibody to hepatitis A virus (ai-HAV) ELISA Kit 人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)試劑盒
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)試劑盒 進(jìn)口分裝
ADVIgGVII腺病毒IgGⅦ型(間接法二步法)
血液乙醇脫氫酶III(S-亞硝基谷胱苷肽還原酶)活性比色法定量試劑盒20次
MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
NDUFAF6蛋白抗體
核糖體蛋白S6激酶1抗體
DKK1重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)
CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)
趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)
ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DKK1重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)
CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
小鼠棕色脂肪細(xì)胞大鼠成肌分化蛋白(MyoD)試劑盒 ,英文名: MyoD ELISA Kit
Rat bladder tumor aigen (BTA) ELISA Kit 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒
RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCR(HumanCalretinin)ELISAKit人鈣結(jié)合蛋白
細(xì)胞氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次
RatCyclin-D2ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行