詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
血液組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7196 |
細胞簡介:
兔外周血白分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群,根據其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類:粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同,分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。根據白細胞的細胞質內有無特殊顆粒,可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞,根據其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞,白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到,血細胞中體積比較大、數量比較少,具有細胞核;其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔外周血白經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠狀腺原酸(T3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠補體片斷5a(C5a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠補體片斷3a(C3a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠17羥孕(17-OHP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠結合蛋白(RBP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit A(IgA)試劑盒
HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Elisa偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒5*96孔5*96孔
真菌/酵母a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯比色法定量試劑盒20次
MouseC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF680標記的核因子κB抑制蛋白E抗體
缺氧誘導基因1C蛋白抗體
HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白
IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)
CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白
HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白
MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
兔外周血白細胞大鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)試劑盒 ,英文名: PTHR2 ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒
Ratcarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFEP(HumanFreeerythrocyteproloporphyrin)ELISAKit人游離原卟啉
細胞基質金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量試劑盒20次
Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行