詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔輸卵管上皮細胞
組織來源:輸卵管
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔輸卵管上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔輸卵管上皮分離自輸卵管組織;輸卵管位于子宮底兩側(cè),包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢,是輸送卵細胞進入子宮的管道,也是卵受精的場所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部,管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞,壺腹部的皺襞,高而多分支,故管腔不規(guī)則;至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細胞和分泌細胞組成。纖毛細胞以漏斗部和壺腹部最多,至峽部和子宮部逐漸減少,纖毛向子宮方向擺動,使卵移向子宮并阻止病菌進入腹膜腔.分泌細胞表面有微絨毛,頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒,其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下,隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進輸卵管上皮細胞的生長的功能活動,在子宮內(nèi)膜增生晚期(排卵前)。纖毛細胞變成高柱狀,纖毛增多,分泌細胞頂部充滿分泌顆粒,功能旺盛。至分泌晚期,兩種細胞均變矮,分泌細胞的分泌顆粒排空,纖毛細胞的纖毛也減少。
方法簡介:
實驗室分離的兔輸卵管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔輸卵管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
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Human immunoglobulin G, Fc segme receptor (Fc gamma R I /CD64) ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒
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EquineBeta-Endorphin,β-EP試劑盒馬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母S腺苷同型半胱核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒規(guī)格:96T/48T
9號染色體開放閱讀框75抗體
親核素β1抗體
HAVCR1重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mgHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原
FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein
CNPY4 Protein Human 重組人 CNPY4 蛋白
IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
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兔輸卵管上皮細胞大鼠堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)試劑盒 ,英文名: FGF2 ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
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CLIAKitforFFA(Humanfreefattyacids)ELISAKit人游離脂肪酸
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