兔膀胱平滑肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔膀胱平滑肌分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調(diào)控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關(guān)，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細胞所經(jīng)歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑，因此，了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構(gòu)成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎(chǔ)與前提。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔膀胱平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔損傷分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔巨噬細胞癥蛋白-5(rabbit MIP-5)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat leptin (LEP) ELISA Kit 大鼠瘦素(LEP)試劑盒

HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCholicacid,CA試劑盒人膽酸(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

總L-高半胱(Hcy)定量試劑盒50次

Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)試劑盒規(guī)格：96T/48T

β1，3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體

磷酸化星形膠質(zhì)細胞升高基因1抗體

HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mgRXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原

CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein

GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)

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GSTM5 Protein Human 重組人 GSTM5 蛋白

HA重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

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CST7重組人 Cystatin 7 / CST7 蛋白 Protein

兔膀胱平滑肌細胞大鼠顆粒酶K(GZMK)試劑盒 ，英文名： GZMK ELISA Kit

Mouse apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒

RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 大鼠(EPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFSHELISAKit魚促卵泡素

細胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量試劑盒20次

RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒規(guī)格：96T/48T