人真皮成纖維細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人真皮成纖維分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒   96T/48T

兔可溶性P選擇素（sP-selectin）試劑盒   96T/48T

兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒   96T/48T

兔抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒   96T/48T

小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat dehydroepiandrosterone S7 (DHEA-S7) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)試劑盒

Humanesogen,EELISAKit 人雌激素(E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollageypeⅢ,ColⅢ試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量試劑盒20次

Humaeceptoyrosinekinase,KsELISAKit人受體酪激酶(Ks)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD10抗體

富含脯同源蛋白1抗體

BCL2L1重組小鼠 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (aa 1-212, His 標(biāo)簽) Protein

白介素17(IL17)重組蛋白 Recombinant Interleukin 17 (IL17)

GOT1重組人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白 Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

P選擇素(SELP)重組蛋白 Recombinant Selectin, Platelet (SELP)

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

ERBB3重組小鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD166 / ALCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

APCS重組人 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein

人真皮成纖維細(xì)胞大鼠前列腺酸性0酸酶(ACP3)試劑盒 ，英文名： ACP3 ELISA Kit

Mouse angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)試劑盒

RatCyclin-D2ELISAKit 大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGRHELISAKit大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素

細(xì)胞單胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量試劑盒20次

RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。