詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7473 |
細胞簡介:
人胰腺癌組織源分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織;胰腺癌是一種惡性程度很高,診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,約90%為起源于腺管上皮的導管腺癌。其發(fā)病率和死亡率近年來明顯上升。5年生存率<1%,是預后最差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,手術死亡率較高,而很低。胰腺癌的病因尚不十分清楚。其發(fā)生與吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、過量飲用咖啡、環(huán)境污染及遺傳因素有關;近年來的調(diào)查報告發(fā)現(xiàn)糖尿病人群中胰腺癌的發(fā)病率明顯高于普通人群;也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發(fā)病存在一定關系,發(fā)現(xiàn)慢性胰腺炎病人發(fā)生胰腺癌的比例明顯增高;另外還有許多因素與此病的發(fā)生有一定關系,如職業(yè)、環(huán)境、地理等。隨著醫(yī)學技術的進步,大部分癌癥的生存率都在提高,例如乳腺癌,結直腸癌等腫瘤,近幾十年來,生存率得到了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滯不前,缺乏有效的治療方法,的死亡率使其成為“王",體外培養(yǎng)胰腺癌組織源細胞對研究胰腺癌的治療具有重要意義。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人胰腺癌組織源經(jīng)檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠試劑盒
小鼠試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠生長激素釋放肽試劑盒 小鼠生長激素釋放肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠生長激素釋放肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠生長激素釋放肽試劑盒、小鼠生長激素釋放肽試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠生長激素釋放多肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠生長激素釋放多肽試劑盒、小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠損傷分子試劑盒 小鼠損傷分子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠損傷分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠損傷分子試劑盒、小鼠損傷分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP試劑盒鴨環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對一甲基)10/20次
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ARC1抗體
非活性雙特異性磷酸酶抗體27抗體
IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
人胰腺癌組織源細胞大鼠熱休克蛋白40(HSP40)試劑盒 ,英文名: HSP40 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒
RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因
細胞超氧化物陰離子比色法定量試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(AIL-R1)試劑盒規(guī)格:96T/48T