詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
臍帶血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7503 |
細(xì)胞簡介:
人臍帶血間充質(zhì)干分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞,可用于造血干細(xì)胞移植;因此,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細(xì)胞,干細(xì)胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細(xì)胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細(xì)胞群體;這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,又可進一步分化為各種組織細(xì)胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用;目前,多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,促進造血干細(xì)胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍帶血間充質(zhì)干采用密度梯度離心法、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人臍帶血間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗中性??贵w試劑盒 小鼠抗中性粒抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗中性??贵w試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗中性??贵w試劑盒、小鼠抗中性??贵w試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒、小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗血小板抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗血小板抗體試劑盒、小鼠抗血小板抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗心0脂抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗心0脂抗體試劑盒、小鼠抗心0脂抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human caneous lymphocyte associated aigen (CLA) ELISA Kit 人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)試劑盒
Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 人胃泌素釋放多肽(GRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human6-hydroxydopamine,6-OHDA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
正苯基萘胺攝入法細(xì)菌膜損傷熒光試劑盒20次
MouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體核糖體蛋白L40抗體
G蛋白結(jié)合蛋白7抗體
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠細(xì)胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ,英文名: CSE ELISA Kit
Mouse retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 小鼠結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHSP-27(Humanheatshockprotein27)ELISAKit人熱休克蛋白27
細(xì)胞MEK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-15大鼠白介素15
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。