詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 多核巨細(xì)胞 | YS-01X7352 |
細(xì)胞簡介:
人破骨分離自骨組織和骨髓;破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人破骨采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人破骨經(jīng)TRAP染色檢測,純度可達(dá)30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 多核巨細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒、小鼠0酸肌醇3激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒 小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠細(xì)胞蛋白試劑盒、小鼠細(xì)胞蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠可溶性試劑盒 小鼠可溶性試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠可溶性試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠可溶性試劑盒、小鼠可溶性eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
纖維母細(xì)胞生長因子4抗體
GLIS1蛋白抗體
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
人破骨細(xì)胞大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)試劑盒 ,英文名: ICAM2 ELISA Kit
Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)試劑盒
MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人熱休克蛋白40
細(xì)胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-17大鼠白介素17
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。