詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
血管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7653 |
細胞簡介:
人淋巴血管內皮分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態(tài)結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達,外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過一個或多個淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮,是構成淋巴管壁的主要結構,參與維持體液平衡,調節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能:①調節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結核。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人淋巴血管內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人淋巴血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISAKit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CamelEndothelin1,ET-1試劑盒內皮素1(ET-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類組織砷元素比色法定量試劑盒20次
MouseInhibin,INH-AELISAKit小鼠抑制素A(INH-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
絲蛋白酶1抗體
APC標記小鼠CD45.2單克隆抗體
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
Isulin 胰島素(抗原 0.5mgIsulin 胰島素(抗原)
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 Protein
CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標簽)
NAALADL1 Protein Mouse 重組小鼠 NAALADL1 蛋白
Isulin 胰島素(抗原 0.5mgIsulin 胰島素(抗原)
CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 (Fc 標簽)
FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
NAALADL1 Protein Mouse 重組小鼠 NAALADL1 蛋白
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 Protein
人淋巴血管內皮細胞大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)試劑盒 ,英文名: UCP2 ELISA Kit
Pla vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 植物3(VD3)試劑盒
MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanALRELISAKit人肝再生增強因子
細胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitVLA大鼠遲現(xiàn)抗原