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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：人角膜成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：眼角膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人角膜成纖維分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血栓素試劑盒 小鼠血栓素試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠血栓素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血栓素試劑盒、小鼠血栓素試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠血栓前體蛋白試劑盒 小鼠血栓前體蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠血栓前體蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血栓前體蛋白試劑盒、小鼠血栓前體蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠血清總補(bǔ)體試劑盒 小鼠血清總補(bǔ)體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠血清總補(bǔ)體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血清總補(bǔ)體試劑盒、小鼠血清總補(bǔ)體試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒、小鼠血清淀粉樣蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Hei Amy Ba aigen ELISA Kit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原試劑盒
Humanprostacycline,PGIELISAKit 人前列環(huán)素(PGI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickenadrenomedullin,ADM試劑盒雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞AKT蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
神經(jīng)束蛋白抗體
6號(hào)染色體開放閱讀框186抗體
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)重組蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
CD69 Protein Human 重組人 CD69 蛋白
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 標(biāo)簽)
性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)重組蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)
CD69 Protein Human 重組人 CD69 蛋白
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 標(biāo)簽)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
人角膜成纖維細(xì)胞大鼠胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)試劑盒 ，英文名： BRAK ELISA Kit
Pla gibberellic acid (GA) ELISA Kit 植物赤霉素(GA)試劑盒
MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanAi-ThrombinIII,AT-IIIELISAKit人抗Ⅲ抗體
細(xì)胞FES激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBigET大鼠大內(nèi)皮素
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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