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產(chǎn)品名稱:人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
組織來源:肝臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
人肝實(shí)質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞,生長營養(yǎng)需求高,在體外存活時(shí)間短;細(xì)胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個(gè)物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子免疫球蛋白G試劑盒 兔子免疫球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白G試劑盒、兔子免疫球蛋白G 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白E試劑盒 兔子免疫球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白E試劑盒、兔子免疫球蛋白E 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白A試劑盒 兔子免疫球蛋白A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白A試劑盒、兔子免疫球蛋白A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子可溶性CD40配體試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCalretinin,CR試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
皮質(zhì)胸腺細(xì)胞樣蛋白VSIG2抗體
豬霍亂沙門氏菌抗體
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞大鼠血小板激活因子(PAF)試劑盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Mouse calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorII,FIIELISAKit人Ⅱ
細(xì)胞CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCAM大鼠鈣調(diào)素
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作