詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7438 |
細胞簡介:
人肝癌組織源分離自患有肝癌病人的肝癌組織;肝癌即肝臟惡性腫瘤,可分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類。原發(fā)性肝臟惡性腫瘤起源于肝臟的上皮或間葉組織,前者稱為原發(fā)性肝癌,是我國高發(fā)的,危害極大的惡性腫瘤;后者稱為肉瘤,與原發(fā)性肝癌相比較較為少見。繼發(fā)性或稱轉(zhuǎn)移性肝癌系指全身多個器官起源的惡性腫瘤侵犯至肝臟。一般多見于胃、膽道、胰腺、結(jié)直腸、卵巢、子宮、肺、乳腺等器官惡性腫瘤的肝轉(zhuǎn)移。原發(fā)性肝癌的病因及確切分子機制尚不清楚,目前認為其發(fā)病是多因素、多步驟的復(fù)雜過程,受環(huán)境和飲食雙重因素影響。流行病學(xué)及實驗研究資料表明,乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染、、飲水污染、酒精、肝硬化、性激素、亞硝胺類物質(zhì)、微量元素等都與肝癌發(fā)病相關(guān)。繼發(fā)性肝癌(轉(zhuǎn)移性肝癌)可通過不同途徑,如隨血液、淋巴液轉(zhuǎn)移或直接侵潤肝臟而形成疾病。
方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人肝癌組織源經(jīng)檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T
小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒 96T/48T
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
內(nèi)皮細胞清道夫受體抗體
腫瘤蛋白P73抗體
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
天冬轉(zhuǎn)氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
天冬轉(zhuǎn)氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
人肝癌組織源細胞大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)試劑盒 ,英文名: MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人補體片斷3a
細胞CASEINKINASE1δ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitOFQ/N大鼠孤腓肽
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。