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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肺靜脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7011 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人肺大靜脈內(nèi)皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動(dòng)物中，把動(dòng)脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個(gè)靜脈里流動(dòng)脈血的血管。左右1對(duì)，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動(dòng)脈高壓，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動(dòng)脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn)，肺動(dòng)脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動(dòng)脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動(dòng)脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán)，才能避免肺動(dòng)脈內(nèi)壓力升高。細(xì)胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠輕化1(HYD)試劑盒
HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-B試劑盒人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體試劑盒規(guī)格：96T/48T
氯離子通道蛋白2抗體
粘蛋白19抗體
RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein
HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原
CLDN11 Protein Human 重組人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
RBP4重組大鼠 RBP4 蛋白 Protein
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)試劑盒 ，英文名： IGFBP2 ELISA Kit
Mouse visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1ELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCTX-2ELISAKit人骨退化特異標(biāo)志物
細(xì)胞a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量試劑盒20次
ELISAKitOPN大鼠骨橋素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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