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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
膽管癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7443 |
細胞簡介：
人膽管癌組織源分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中最常見的一類。相對應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細胞，是一種變異的細胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂），還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
方法簡介：
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人膽管癌組織源經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
晚期氧化蛋白產(chǎn)物 (AOPP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
人 Apelin(Apelin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
增殖誘導配體 (APRIL) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠7α-羥化酶(CYP7A1)試劑盒 96T/48T
Human placeal alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)試劑盒
Humanai-thrombieceptor,AELISAKit 人抗受體(A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanAzidothymidine,AZT試劑盒人(AZT)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物源性飼料處理試劑盒20次
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit人抗復合物(TAT)試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸肌醇3磷酸結(jié)合蛋白2抗體
原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (Fc 標簽) Protein
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 酸激酶-M2(抗原)
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
FGFR1OP Protein Human 重組人 FGFR1OP / FOP 蛋白 (His & GST 標簽)
ENTPD1 Protein Mouse 重組小鼠 CD39 / ENTPD1 蛋白
M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 酸激酶-M2(抗原)
FGFR1OP Protein Human 重組人 FGFR1OP / FOP 蛋白 (His & GST 標簽)
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ENTPD1 Protein Mouse 重組小鼠 CD39 / ENTPD1 蛋白
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
人膽管癌組織源細胞大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)試劑盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit
Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人細胞周期素D3
細胞AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitON大鼠骨粘連蛋白
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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