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大鼠主動脈外膜成纖維細胞

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更新時間:2024-10-29 15:09:37瀏覽次數(shù):106

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7643 主要用途 僅供科研研究實驗
大鼠主動脈外膜成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:胰島素生長因子樣家族成員1抗體 FAM105B蛋白抗體 磷酸二酯酶6α抗體 大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞 小鼠大隱靜脈平滑肌細胞 CAL-120人乳腺癌細胞 BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細胞)

詳細介紹

大鼠主動脈外膜成纖維細胞

大鼠主動脈外膜成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

主動脈組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7643

細胞簡介:

大鼠主動脈外膜成纖維分離自主動脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠主動脈外膜成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠主動脈外膜成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(F-Ag)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅸ(F)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅹ(F)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠膠原酶Ⅲ(Collagenase )ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit 人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/)50

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

跨膜蛋白28/TMEM28抗體

鋅指蛋白214抗體

PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein

腦型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)

ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 Protein

EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA)

腦型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)

EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA)

ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 Protein

大鼠主動脈外膜成纖維細胞大鼠早老素1(PSEN1)試劑盒 ,英文名: PSEN1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒

MouseIerleukin3,IL-3ELISAKIT 小鼠白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃腸癌標志物CA199

細胞/組織mRNA直接化試劑盒10

ELISAKitTIMP-4大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4


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