詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
牙髓組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7731 |
細(xì)胞簡介:
大鼠牙髓干分離自滑膜組織;牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細(xì)小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經(jīng)、血管,淋巴和結(jié)締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細(xì)胞,其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機(jī)體抵抗力的差異,出現(xiàn)不同的病理變化,在臨床上會(huì)表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時(shí)間較長后,轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔血管生成素2試劑盒 兔血管生成素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔血管生成素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血管生成素2試劑盒、兔血管生成素2 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒、兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔血管緊張素Ⅱ試劑盒 兔血管緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔血管緊張素Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血管緊張素Ⅱ試劑盒、兔血管緊張素Ⅱ 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒
Humanchaperonin10,CPN10ELISAKit 人伴侶蛋白10(CPN10)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancirculatingimmunecomplex,CIC試劑盒人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白H1激酶免疫共沉淀試劑盒10次
Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit人的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體
GFRA3重組小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 Protein
肌球蛋白重鏈1(MYH1)重組蛋白 Recombinant Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)
CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白
IL13RA2 Protein Canine 重組狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白
肌球蛋白重鏈1(MYH1)重組蛋白 Recombinant Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白
GFRA3重組小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 Protein
IL13RA2 Protein Canine 重組狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白
CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein
大鼠牙髓干細(xì)胞大鼠周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)試劑盒 ,英文名: CDKN2A ELISA Kit
Mouse ai platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽
微型RNA(miRNA)北方雜交試劑盒5次
ELISAKitMIF大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。