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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：大鼠心臟干細(xì)胞
組織來源：心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 長梭形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
大鼠心臟干分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細(xì)胞是一種多潛能細(xì)胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。體內(nèi)研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細(xì)胞，經(jīng)體外簡單培養(yǎng)、增殖和標(biāo)記后，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動(dòng)力學(xué)和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記的心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。盡管其新生心肌細(xì)胞較小，但表達(dá)一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動(dòng)蛋白、α-輔肌動(dòng)蛋白、連接蛋白等，證實(shí)了心臟干細(xì)胞對心肌梗死的修復(fù)作用。干細(xì)胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細(xì)胞重建的主要方法，成體干細(xì)胞中的c-kit陽性心臟干細(xì)胞因其來源于心臟，有定向心臟細(xì)胞系分化的趨勢，體內(nèi)外可以分化成心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，同時(shí)自體移植不存在免疫排斥反應(yīng)及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點(diǎn)。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細(xì)胞是這一治療應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵所在。因此，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時(shí)期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細(xì)胞成為目前干細(xì)胞領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問題之一。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟干采用機(jī)械剪碎組織、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁、心臟干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟干經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 96T/48T
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒 96T/48T
小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒 96T/48T
小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T
小鼠固酮(ALD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒
Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 人堿性胎兒蛋白(BFP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLA試劑盒豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞活性線粒體分離試劑盒10次
Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
干擾素調(diào)節(jié)因子9抗體
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5抗體
PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein
Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白
SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein
CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標(biāo)簽)
NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍(lán)蛋白
CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標(biāo)簽)
PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein
NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein
大鼠心臟干細(xì)胞大鼠阻抑素(PHB)試劑盒 ，英文名： PHB ELISA Kit
Mouse tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒
MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 小鼠神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標(biāo)志物
土壤砷元素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitA大鼠抗受體
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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