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大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7147 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人類(lèi)乳頭狀瘤病毒HPV116 gp2抗體 尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白抗體 磷脂酸磷酸酶2C抗體 大鼠心臟干細(xì)胞 小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞 ACHN人腎細(xì)胞癌細(xì)胞 SHZ-88 (大鼠乳腺癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

小腸組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X7147

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠小腸血管內(nèi)皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運(yùn)動(dòng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞除了吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織等,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠褪黑素(MT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) ELISA Kit 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒

HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit ICE蛋白酶激活因子(IRAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR試劑盒雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20

MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規(guī)格:96T/48T

/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體

神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)

FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)

熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)

CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)

FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)試劑盒 ,英文名: HAT1 ELISA Kit

Nude mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 裸鼠蛋酸酶(PP)試劑盒

MouseIerleukin-7,IL-7ELISAkit 小鼠白介素7(IL-7)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanmajorhistocompatibilitycomplexI,MHCI/HLAIELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)

土壤α活性DNS比色法定量試劑盒20

ELISAKitACA-IgM大鼠抗心0脂抗體IgM

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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