詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7432 |
細胞簡介:
大鼠神經(jīng)星形膠質分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質細胞,是哺乳動物腦內分布泛的一類細胞,也是膠質細胞中體積最大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(銀染色)顯示此類膠質細胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內表面,彼此連接構成膠質界膜。細胞剛分離時呈圓形,24h后大部分細胞貼壁,均勻分布于瓶底,部分細胞伸出細小突起,培養(yǎng)4-5d后細胞數(shù)量明顯增多,呈扁平、多角形,胞質豐富且核漿較少,細胞核呈橢圓形,偏于胞體一側。神經(jīng)星形膠質細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細胞組成,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質,在維持神經(jīng)元內外環(huán)境、生存、遷移、免疫調節(jié)、信號轉導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠神經(jīng)星形膠質經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白介素12(IL-12/P40)ELISAKit ELISA.
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISAKit ELISA.
豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)ELISAKit ELISA.
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA.
豬(Dex)ELISA 試劑盒
Human arginase (Arg) ELISA Kit 人精酶(Arg)試劑盒
PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-AP(RabbitAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit兔子α2抗纖溶酶
血液亮(leucine含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mouseβ-hexosaminidaseA,β-HexAELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A(β-HexA)試劑盒
γ-谷氨酰水解酶抗體
磷酸羧化酶2抗體
CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白 Protein
FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原
CAMK2B重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白
SPARC Protein Mouse 重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標簽)
FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白
CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白 Protein
SPARC Protein Mouse 重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標簽)
CAMK2B重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠神經(jīng)星形膠質細胞兔白細胞介素-35(IL-35)試劑盒
Rat acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒
HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)試劑盒 進口分裝
Humanglycogensyhasekinase,GSK試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒
組織蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次
Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit人單胺氧化酶(MAO)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。