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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7135 |
細胞簡介：
大鼠肝實質分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質細胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質細胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質細胞屬于中高度分化細胞，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短；細胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內重要的器官，在整個物質代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肝實質采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肝實質經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠特異生長因子/相關因子(TSGF)試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子樣弱凋亡因子（TWEAK）試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)試劑盒 96T/48T
小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T
小鼠天門冬酸基轉移酶(AST)試劑盒 96T/48T
Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人軟骨素(CS)試劑盒
HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2試劑盒雞轉化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織蛋白酶H輕連抗體
雌酮-3-葡糖苷酸抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
SERPINF2重組人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標簽)
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標簽)
SERPINF2重組人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
大鼠肝實質細胞小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA 試劑盒
Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒
Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanactivatedproteinC,APC試劑盒人活化蛋白C(APC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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