詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7131 |
細胞簡介:
大鼠腸靜脈內(nèi)皮分離自腸靜脈;腸道指的是從胃幽門的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠腸靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠腸靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物檢測試劑盒 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒、小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體檢測試劑盒 小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒、小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠檢測試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠支原體檢測試劑盒 小鼠支原體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠支原體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠支原體試劑盒、小鼠支原體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T
One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型腦抗體IgG(JE IgG)檢測試劑盒
HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B細胞受體(BCR)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB檢測試劑盒雞核因子κB(NF-κB)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞P38蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
原鈣粘蛋白β3抗體
SAPS結(jié)構(gòu)域家族1抗體
NS2重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein
PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽) Protein
CECR1 Protein Human 重組人 CECR1 / ADA2 蛋白
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)
PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原
CECR1 Protein Human 重組人 CECR1 / ADA2 蛋白
NS2重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽) Protein
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒
One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)檢測試劑盒
Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白
熒光穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。