詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細胞 | YS-01X7558 |
細胞簡介:
大鼠外周血單核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發(fā)育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續(xù)增大,直徑可達50-80μm,細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛(wèi)機制,還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。
方法簡介:
見說明
質量檢測:
本公司生產(chǎn)的大鼠外周血單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠纖連蛋白檢測試劑盒 小鼠纖連蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠纖連蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠纖連蛋白試劑盒、小鼠纖連蛋白檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠胃腸癌標志物檢測試劑盒 小鼠胃腸癌標志物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠胃腸癌標志物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胃腸癌標志物試劑盒、小鼠胃腸癌標志物檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠lisa試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠lisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠網(wǎng)膜素檢測試劑盒 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠網(wǎng)膜素試劑盒、小鼠網(wǎng)膜素檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠胃動素(MTL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phospholipase C (PLC) ELISA Kit 人0酯酶C(PLC)檢測試劑盒
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 人孤腓肽(OFQ/N)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenIerleukin1β,IL-1β檢測試劑盒雞白介素1β(IL-1β)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
液泡蛋白分選蛋白25抗體
PE標記小鼠CD152單克隆抗體
TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein
血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
血小板衍生生長因子A(PDGFA)重組蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
CDK2 Protein Human 重組人 CDK2 / p33 蛋白
TCN2重組人 TCN2 蛋白 Protein
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
HA重組甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
大鼠外周血單核細胞豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒
People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)檢測試劑盒
Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 豬-葡萄糖共轉運載體1(SGLT1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人堿性0酸酶
血液卵0脂乙酰轉移酶(LCAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。