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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細胞 | YS-01X7042 |
細胞簡介：
大鼠肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應，保持靜脈管腔的通暢，還是多數動脈疾病的靶細胞。
方法簡介：
見說明
質量檢測：
本公司生產的大鼠肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；經alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
人原鈣黏素1(PCDH1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit
人原鈣黏素β2(PCDHβ2)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit
人原纖蛋白1(FBN1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
人原纖蛋白2(FBN2)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit
Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大細胞類(MCT)檢測試劑盒
rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgG
細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit兔內皮型合成酶(eNOS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
嗅覺受體家族5亞基1抗體
Pacific Blue標記人CD56 (NCAM)單克隆抗體
IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽) Protein
KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽) Protein
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞豬透明質酸(HA)ELISA 試劑盒
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)檢測試劑盒
GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforANG-R-Tie1ELISAKit大鼠血管生成素受體Tie1
血液超氧化物陰離子化學發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
PorcineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit豬促卵泡素(FSH)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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