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詳細介紹
商品屬性：
| 組織來源 | .產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
| 雞卵泡組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X6992 |
細胞簡介：
雞卵泡顆粒分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內(nèi)膜細胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管，外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞，在卵泡開始發(fā)育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮蛯?，因其細胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層；次級卵泡的顆粒細胞增至復層；成熟卵泡的顆粒細胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細胞的胞核大而圓，著色深，細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。
方法簡介：
實驗室分離的雞卵泡顆粒采用先機械分離后膠原酶 -聯(lián)合消化法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的雞卵泡顆粒細經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細胞形態(tài)上皮細胞樣
傳代特性可傳1代
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| Reprimo蛋白(RPRM)檢測試劑盒 | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞 |
| REST輔抑制因子1(RCOR1)檢測試劑盒 | 豬脂肪細胞 |
| REST輔抑制因子2(RCOR2)檢測試劑盒 | 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞 |
| REST輔抑制因子3(RCOR3)檢測試劑盒 | 兔視網(wǎng)膜色素上皮細胞 |
| RET原癌基因(RET)檢測試劑盒 | 雞肺動脈平滑肌細胞 |
| R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒 | 人肺大靜脈內(nèi)皮細胞 |
| R-脊椎蛋白2(RSPO2)檢測試劑盒 | 小鼠氣管上皮細胞 |
| R-脊椎蛋白3(RSPO3)檢測試劑盒 | 豬前脂肪細胞 |
| R-脊椎蛋白4(RSPO4)檢測試劑盒 | 大鼠氣管上皮細胞 |
| S100鈣結合蛋白(S100)檢測試劑盒 | 兔晶狀體上皮細胞 |
| S100鈣結合蛋白A10(S100A10)檢測試劑盒 | 雞胚成纖維細胞 |
| S100鈣結合蛋白A12(S100A12)檢測試劑盒 | 人肺大靜脈平滑肌細胞 |
| S100鈣結合蛋白A13(S100A13)檢測試劑盒 | 小鼠氣管平滑肌細胞 |
| S100鈣結合蛋白A14(S100A14)檢測試劑盒 | 豬內(nèi)皮細胞 |
| S100鈣結合蛋白A2(S100A2)檢測試劑盒 | 大鼠氣管平滑肌細胞 |
| S100鈣結合蛋白A5(S100A5)檢測試劑盒 | 兔肌腱干細胞 |
| S100鈣結合蛋白A6(S100A6)檢測試劑盒 | 雞前脂肪細胞 |
| S100鈣結合蛋白A7(S100A7)檢測試劑盒 | 雞卵泡顆粒細胞人肺動脈成纖維細胞 |
| S100鈣結合蛋白A8(S100A8)檢測試劑盒 | 小鼠肺成纖維細胞 |
| S100鈣結合蛋白A9(S100A9)檢測試劑盒 | 豬成骨細胞 |
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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