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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：小鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：陰莖
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠陰莖白膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠陰莖白膜成纖維分離自陰莖白膜組織；海綿體，又稱海綿體肌，是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅(jiān)厚的白膜，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的陰莖白膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。陰莖白膜成纖維細(xì)胞（PLFs）作為牙周膜的主體細(xì)胞，是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞，它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過(guò)程?，F(xiàn)在，利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰莖白膜成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰莖白膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA試劑盒 組裝/原裝
豬乙型腦病毒抗體IgG試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 組裝/原裝
豬乙酰(ACh)試劑盒 組裝/原裝
BADH2(水稻)抗體
16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體
PARP1重組小鼠 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)重組蛋白 Recombinant X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)
FUCA1重組人 FUCA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HFE2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Hemojuveli僀?僀
Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)重組蛋白 Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5)
BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IFNG重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CNTFR Protein Rat 重組大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RTN4R重組人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
豬血清(NO)ELISA 試劑盒
Human myosin light chain (MLC) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒
RabbitLebtospiraIgGELISAKit 兔鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒分裝
CLIAKitforAi-TG甲狀腺球蛋白抗體(TG抗體)
血液3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次
Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒
小鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒 ，英文名： u-T4 ELISA Kit
Rabbit iestinal fatty acid binding protein (iFABP) ELISA Kit 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMHCI/H-2I(MousemajorhistocompatibilitycomplexI)ELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類
體液(UROKINASE)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitLS牛乳糖合成酶
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