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豬腦微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2024-11-07 14:39:02瀏覽次數(shù):736

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells
貨號 YS-01X8555 主要用途 僅供科研研究實驗
豬腦微血管內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:SK-OV-3+LUC人卵巢癌細胞熒光素酶標記 H9 (人T淋巴細胞系) 兔主動脈內(nèi)皮細胞 人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗體 小鼠口腔粘膜成纖維細胞 K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細胞) 兔肺動脈成纖維細胞 磷酸化組蛋白H4抗體

詳細介紹

豬腦微血管內(nèi)皮細胞

豬腦微血管內(nèi)皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細胞樣

YS-01X8555

細胞簡介:

豬腦微血管內(nèi)皮分離自腦組織;腦微血管內(nèi)皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細胞與外周內(nèi)皮細胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細胞表面表達細胞粘附分子,調(diào)控白細胞進入大腦。由于微血管內(nèi)皮細胞的器官特異性,內(nèi)皮細胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細胞旁的通量;②腦微血管內(nèi)皮細胞缺乏內(nèi)皮細胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;③腦微血管內(nèi)皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

方法簡介:

實驗室分離的豬腦微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的豬腦微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBSEGF、bFGF、IGFVEGF、Heparin、HydrocortisonePenicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

豬腦微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

豬腦微血管內(nèi)皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

豬腦微血管內(nèi)皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒   組裝/原裝

豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒   組裝/原裝

豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒   組裝/原裝

0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒   組裝/原裝

FITC標記人CD11c單克隆抗體

酸性線粒體肌酸激酶抗體

CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動蛋白2抗體

BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein

ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)

TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1僀?僀

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動蛋白2抗體

ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)

CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白

BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein

豬內(nèi)皮型合酶(eNOS)試劑盒

Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝

CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素

血液S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活酶動力性比色法定量試劑盒20

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKitB細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒

豬腦微血管內(nèi)皮細胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit

Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯(lián)物(PY)試劑盒

桿菌(BA)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽

體液元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20

ELISAKitPNP人Ⅲ型前膠原肽

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行


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