詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胚胎肝 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8248 |
細胞簡介:
大鼠胚肝間充質(zhì)干分離自胚胎肝組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。間充質(zhì)干細胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用。間充質(zhì)干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。胚胎肝非實質(zhì)細胞中含有MSC,且量較大,可成為種子細胞。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠胚肝間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素18(IL-18)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素17(IL-17)試劑盒 96T/48T
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuron specific enolase (NSE) ELISA Kit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒
humanBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 人β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Mi2-aibody試劑盒人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物培養(yǎng)細胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
6號染色體開放閱讀框97抗體
磷酸化突觸后密度蛋白93抗體
IL7R重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇激酶抗原
OMG重組人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 標簽) Protein
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 標簽)
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇激酶抗原
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 標簽)
IL7R重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
OMG重組人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 標簽) Protein
大鼠胚肝間充質(zhì)干細胞大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 ,英文名: IL-6 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 小鼠白介素1β (IL-1β)試劑盒
ELISA 小鼠組胺(mouse HIS) 進口分裝
CLIAKitforINSELISAKit大鼠胰島素
通用型副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20次
ELISAKitApo-E大鼠載脂蛋白E
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行