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大鼠小氣道平滑肌細胞

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更新時間:2024-11-05 10:18:22瀏覽次數(shù):699

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8268 主要用途 僅供科研研究實驗
大鼠小氣道平滑肌細胞公司正在出售的產(chǎn)品:人早幼粒白血病細胞+LUC;HL-60-LUC LS513 (人結(jié)直腸癌細胞) 兔乳腺上皮細胞 HDHD2B蛋白抗體 小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞 TBC結(jié)構(gòu)域的蛋白激酶樣蛋白抗體 人心臟纖維原細胞 eIF4E結(jié)合蛋白2抗體

詳細介紹

大鼠小氣道平滑肌細胞

大鼠小氣道平滑肌細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

小氣道

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X8268

細胞簡介:

大鼠小氣道平滑肌分離自小氣道組織;臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,但易阻塞的特點。在平靜吸氣時,空氣進入狹窄的鼻咽部,產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,管腔通暢性不象軟骨性氣道,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應、產(chǎn)生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子,并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞;小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小氣道的生理功能特點:①小氣道阻力?。虎跉饬魉俣嚷?;③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細胞主要功能:①保持氣道張力維持小氣道形態(tài);②肺小氣道進行氣體交換,病變可引起換氣功能障礙;③炎癥、痰液阻塞或當氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化:①支氣管炎;②肺氣腫;③慢性阻塞性肺疾病。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠小氣道平滑肌細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠小氣道平滑肌細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠促黃體生成激素(mouse LH)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠(mouse Lysozyme)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠巨嗜細胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠MCP-3(mouse MCP-3)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human bactericidal / permeability increasing protein (BPI) ELISA Kit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)試劑盒

Humanpokeweedmitogen,PWMELISAKit 人美洲商陸素(PWM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgG試劑盒人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物結(jié)構(gòu)域重排甲基轉(zhuǎn)移酶(DomaiearrangedMethylase;DRM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20

HumanVitaminK1,VK1ELISAKitK1(VK1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ChAT乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體

尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白A2抗體

PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原

PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標簽) Protein

ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白

AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白

CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原

ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白

PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白

PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標簽) Protein

大鼠小氣道平滑肌細胞大鼠白介素23(IL-23)試劑盒 ,英文名: IL-23 ELISA Kit

Mouse leukocyte differeiation aigen 30 (CD30) ELISA Kit 小鼠白細胞分化抗原30(CD30)試劑盒

ELISA 小鼠IgM(mouse IgM)  進口分裝

CLIAKitforIL-8/CXCL8(Mouseierleukin8)ELISAKit小鼠白介素8

通用型海鳥彎曲桿菌(Campylobacterlaridis)試劑盒20

ELISAKitAch大鼠乙酰


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