詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人骨髓造血干細(xì)胞
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不建議傳代
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人骨髓造血干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
人骨髓造血干分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細(xì)胞具有自我更新能力并能分化為各種血細(xì)胞的前提細(xì)胞,終生成各種血細(xì)胞成分,包括紅細(xì)胞,白細(xì)胞和血小板。造血干細(xì)胞需要根據(jù)機(jī)體的生理需求適時的補(bǔ)充血液系統(tǒng)各個成熟細(xì)胞組分。同時在損傷、炎癥等應(yīng)激狀態(tài)下,造血干細(xì)胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細(xì)胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細(xì)胞移植廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實(shí)體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細(xì)胞瘤,乳腺癌,小細(xì)胞肺癌,主要應(yīng)用于常規(guī)治療失敗或復(fù)發(fā)難治以及具有不良預(yù)后因素的患者。造血干細(xì)胞以不對稱有絲分裂方式進(jìn)行增殖,一個干細(xì)胞分裂產(chǎn)生兩個子細(xì)胞,一個分化為造血祖細(xì)胞,另一個則保持干細(xì)胞特征。造血干細(xì)胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細(xì)胞同時,保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,造血干細(xì)胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右。 造血干細(xì)胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細(xì)胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細(xì)胞),缺少滋養(yǎng)層細(xì)胞不增殖,無法長期培養(yǎng),本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細(xì)胞灌裝發(fā)貨,不包含滋養(yǎng)層,因此收貨后建議盡快實(shí)驗(yàn)。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓造血干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓造血經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗血小板抗體IgG 英文名稱: Mouse Aiplatelet aibody 規(guī)格: 英文縮寫: APAb
小鼠載脂蛋白AI 英文名稱: Mouse Apolipoprotein AI 規(guī)格: 英文縮寫: Apo-AI
小鼠載脂蛋白B 英文名稱: Mouse Apolipoprotein B 規(guī)格: 英文縮寫: Apo-B
小鼠載脂蛋白E 英文名稱: Mouse Apolipoprotein E 規(guī)格: 英文縮寫: ApoE
小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒
HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
正常大鼠(SpragueDawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受體抗體試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體
神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體
Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽) Protein
Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白
FGFR2重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein
CST8 Protein Human 重組人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ACP5 Protein Human 重組人 ACP5 / TRAP 蛋白
Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白
CST8 Protein Human 重組人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽) Protein
ACP5 Protein Human 重組人 ACP5 / TRAP 蛋白
FGFR2重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein
人骨髓造血干細(xì)胞大鼠白介素13(IL-13)試劑盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit
Mouse pyruvate kinase M2 isoenzyme (M2-PK) ELISA Kit 小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒
ELISA 小鼠IP-10(mouse IP-10) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-2RELISAKit大鼠白介素2受體
通用型艱難梭菌(Closidiumdifficile)試劑盒20次
ELISAKitPF-4/CXCL4大鼠血小板因子4