詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞
組織來源:骨骼肌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔骨骼肌衛(wèi)星體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
兔骨骼肌衛(wèi)星分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細(xì)胞)外的一種扁平、有突起的細(xì)胞。著于肌纖維(肌細(xì)胞)表面;當(dāng)肌纖維(肌細(xì)胞)受損后,肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細(xì)胞)的修復(fù),因此具有干細(xì)胞性質(zhì)。
方法簡介:
實驗室分離的兔骨骼肌衛(wèi)星采用-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔骨骼肌衛(wèi)星經(jīng)Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
肽酶抑制因子3 英文名稱: Human Peptidase Inhibitor 3 英文縮寫: PI-3
過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱: Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 英文縮寫: PPARγ
0酸化SMAD2/3抗體 英文名稱: Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody 英文縮寫: PSMAD2/3 Ab
0酸化核因子κB 英文名稱: Human phosphor-Nuclear Factor kappa B 英文縮寫: pNFκB
半胱蛋白酶抑制劑9樣蛋白抗體
卵泡刺激素結(jié)合蛋白2抗體
APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein
蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
OMG重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標(biāo)簽) Protein
COLEC12 Protein Rat 重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白
CXCL10重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein
豌豆凝集素(PSA)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat cardiac anscription factor GATA4 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4
Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISAKit 人抗胰島素受體抗體(AIRA)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MB試劑盒人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織C-TAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit人前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)試劑盒 ,英文名: AGC ELISA Kit
Monkey Vascuoar endothelial cell growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒
RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原
細(xì)胞活力藍(lán)色熒光試劑盒50次
RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒規(guī)格:96T/48T