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兔虹膜色素上皮細(xì)胞

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更新時間:2024-11-05 13:54:39瀏覽次數(shù):652

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8366 主要用途 僅供科研研究實驗
兔虹膜色素上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:ID8+LUC小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HMC3 (人小膠質(zhì)細(xì)胞) 兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄因子HRT3抗體 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 即刻早期應(yīng)答蛋白5抗體 人源NK細(xì)胞 EIF2B2蛋白抗體

詳細(xì)介紹

兔虹膜色素上皮細(xì)胞

兔虹膜色素上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

眼球

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X8366

細(xì)胞簡介:

兔虹膜色素上皮分離自眼球虹膜組織;虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分,屬于眼球中層,位于血管膜的前部;在睫狀體前方虹膜,中心有一圓形開口,稱為瞳孔,猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈,內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時,虹膜會收蹜,只使一小束光線穿透瞳孔,進(jìn)入眼睛;當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中,虹膜就會往后退縮,使瞳孔變大,讓更多的光線進(jìn)入眼睛,多數(shù)的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞(IPE)是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,位于虹膜組織的后面,和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)同樣起源于神經(jīng)外胚葉層,可能具有相似的生物學(xué)功能,因此對IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

實驗室分離的兔虹膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔虹膜色素上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔虹膜色素上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔虹膜色素上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔虹膜色素上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠CD34(mouse CD34)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)   作用:   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體

小鼠抗人CD19單克隆抗體

FCGRT & B2M重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

雌激素受體β(ERβ)重組蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)

EPHA2重組人 EphA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽)

CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / 僀?僀

ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 0.5mgADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽)

FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽) Protein

CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SULT1A3重組人 SULT1A3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA 試劑盒

Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 2 (Eotaxin 2/CCL24) ELISA Kit 人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)試劑盒

Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒分裝

Humanai-thymocyteglobulin,ATG試劑盒人抗細(xì)胞球蛋白(ATG)試劑盒

植物線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20

Humanansthyretin,TELISAKit人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)試劑盒

兔虹膜色素上皮細(xì)胞大鼠整合素α2(ITGα2)試劑盒 ,英文名: ITGα2 ELISA Kit

Mouse granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒

MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit 小鼠白介素15(IL-15)試劑盒分裝

CLIAKitforHumanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit人谷脫羧酶

物理法冰凍切片抗原修復(fù)處理試劑盒50

ELISAKitPTHrP大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白


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