詳細(xì)介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品名稱 | ENK elisa試劑盒 |
英文名稱 | ENK Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
α2plasmininhititor,α2PIELISAKit小鼠α2纖溶酶抑制物(α2PI)ELISA試盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T≥98%Koumine*:*:鉤吻素子規(guī)格:
Ubiquitin,UbELISAKit小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T≥98%Poncirin*:*:枸橘苷規(guī)格:
αLiduronidase,IDUAELISAKit小鼠αL艾杜糖苷酶(IDUA)ELISA試盒規(guī)格:96T/48T≥98%Sanguinarinecitrate*:*:枸櫞血根規(guī)格:
αNacetylglucosaminidase,αNAGELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試盒*規(guī)格:96T/48T≥Columbin*:*:古倫賓規(guī)格:
αmannosidase,αManaseELISAKit小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T≥denudatine*:*:光翠雀規(guī)格:
annexinⅤ,ANXⅤELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANXⅤ)ELISA試盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T≥98%Glabridin*:*:光甘草定規(guī)格:
規(guī)格:3.0g12115600602TLC法鑒別*:白附子(獨(dú)角蓮)兔子髓性蛋白(MBP)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:1g12115700402TLC法鑒別*:重樓(云南重樓)人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:3.0g12115800602TLC法鑒別*:桑椹小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:0.5g12115900001TLC法鑒別*:粉萆薢豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:1g12116000502TLC法鑒別*:銀杏葉大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:0.5g12116100001TLC法鑒別*:紫荊皮兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISAKit,48T/96T
規(guī)格:4g12116200402TLC法鑒別*:翻白草人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISAKit,48T/96T
ENK elisa試劑盒13286-32-3重組人 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 標(biāo)簽) 稻瘟
168088-61-7重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (His 標(biāo)簽) 嘧肟草 48T/96TELISA Kit for Pre-B-Lymphocyte Gene 3 (VPREB3)哥倫比亞4-形葡糖苷培養(yǎng)
48T/96TELISA Kit for Vezatin (VEZT)安德雷德氏糖類肉湯
48T/96TELISA Kit for Otubain 1 (OTUB1)OF培養(yǎng)
48T/96TELISA Kit for Otubain 2 (OTUB2)EYA培養(yǎng)礎(chǔ)
48T/96TELISA Kit for Tenascin M (TNM)
48T/96TELISA Kit for Tenascin M2 (TENM2)強(qiáng)化梭鑒別瓊脂
48T/96TELISA Kit for Tenascin M3 (TENM3)強(qiáng)化梭培養(yǎng)
113158-40-0重組人 CD44 蛋白 (His 標(biāo)簽) 噁禾草靈
819重組人 FLRT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 無花果蛋白酶
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。