化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
軟骨 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8401 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔顳下頜關(guān)節(jié)軟骨分離自顳下頜關(guān)節(jié)軟骨組織，顳下頜關(guān)節(jié)又稱顳頜關(guān)節(jié)"或下頜關(guān)節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)組成，左右合成一聯(lián)合關(guān)節(jié)，主理張口閉口和咀嚼運(yùn)動(dòng)。關(guān)節(jié)囊松弛，側(cè)方為內(nèi)、外側(cè)韌帶所加強(qiáng)。囊內(nèi)的關(guān)節(jié)盤呈卵圓形，由纖維軟骨組成，區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀，前凹后凸，與關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對(duì)應(yīng)；下面凹正對(duì)下頜頭，周緣與關(guān)節(jié)囊相接，前緣與穿過(guò)關(guān)節(jié)囊的翼外肌腱相連。關(guān)節(jié)盤將關(guān)節(jié)腔分成上、下兩半。關(guān)節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關(guān)節(jié)面，這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來(lái)而不會(huì)掉下來(lái)，同時(shí)當(dāng)受到壓力時(shí)候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細(xì)胞，軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成，這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒(méi)有神經(jīng)支配，也沒(méi)有血管，其營(yíng)養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中，關(guān)節(jié)軟骨的這種營(yíng)養(yǎng)代謝必須通過(guò)關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)，使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)對(duì)于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層，單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形，長(zhǎng)軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見(jiàn)數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顳下頜關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顳下頜關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔顳下頜關(guān)節(jié)軟骨體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠抗中性?？贵w試劑盒 小鼠抗中性?？贵w試劑盒 小鼠抗中性粒抗體試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗中性?？贵w試劑盒、小鼠抗中性?？贵w試劑盒
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒、小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體試劑盒
小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗血小板抗體試劑盒、小鼠抗血小板抗體試劑盒
小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗心0脂抗體試劑盒、小鼠抗心0脂抗體試劑盒
線粒體核糖體蛋白L40抗體
G蛋白結(jié)合蛋白7抗體
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human caneous lymphocyte associated aigen (CLA) ELISA Kit 人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)試劑盒
Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 人胃泌素釋放多肽(GRP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Human6-hydroxydopamine,6-OHDA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
正苯基萘胺攝入法細(xì)菌膜損傷熒光試劑盒20次
MouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞大鼠細(xì)胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ，英文名： CSE ELISA Kit
Mouse retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 小鼠結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHSP-27(Humanheatshockprotein27)ELISAKit人熱休克蛋白27
細(xì)胞MEK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-15大鼠白介素15
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
化工儀器網(wǎng)