詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胚胎肝 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8405 |
細(xì)胞簡介:
兔胚肝間充質(zhì)干分離自胚胎肝組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,促進(jìn)造血干細(xì)胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。胚胎肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中含有MSC,且量較大,可成為種子細(xì)胞。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚肝間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚肝間充質(zhì)經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胚肝間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞毒 T 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
結(jié)締組織生長因子 (CTGF) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
心肌營養(yǎng)素 -1(CT-1) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
心肌鈣蛋白 I(cTnI) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
piwi樣1蛋白抗體
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標(biāo)僀?
Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
小鼠(AZT)ELISA 試劑盒
Human acid sphingomyelinase (ASM) ELISA Kit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒
Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 人血小板因子3(PF-3)試劑盒分裝
Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5試劑盒人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)試劑盒
植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量試劑盒(包括萃取)20次
HumahyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit人促甲狀腺素(TSH)試劑盒
兔胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)試劑盒 ,英文名: FGF1 ELISA Kit
Mouse ferritin (FE) ELISA Kit 小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒
ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒分裝
CLIAKitforhiston-H2bELISAKit大鼠組蛋白H2b
細(xì)胞ROCK-I激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPⅢNP大鼠Ⅲ型前膠原肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行