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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠外周血樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
組織來(lái)源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 樹(shù)突狀
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞，全稱(chēng)樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)，是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專(zhuān)職抗原呈遞細(xì)胞(APC)，能攝取、加工及呈遞抗原，啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類(lèi)與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞，因其細(xì)胞膜向外伸出，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹(shù)狀突起，故而命名為樹(shù)突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血樹(shù)突狀(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 96T/48T
小鼠組織多肽抗原(TPA)試劑盒 96T/48T
小鼠組織蛋白去乙?；?span>(HD)試劑盒 96T/48T
小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒
HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 人溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor17-OHP(Mouse17-Hydroxyprogesterone)ELISAKit小鼠17羥孕同
飲料環(huán)(cyclamate)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體
Synaptophysin單克隆抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標(biāo)簽) Protein
SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)
S100A9重組人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein
CD1B & B2M Protein Human 重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白
IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)
CD1B & B2M Protein Human 重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標(biāo)簽) Protein
IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
S100A9重組人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein
小鼠外周血樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)大鼠抵抗素(Resistin)試劑盒 ，英文名： Resistin ELISA Kit
Porcine iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
番茄特定基因序列(PG)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforL-Selectin/CD62LELISAKit大鼠L選擇素
通用HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液100毫升
ELISAKitsEPCR雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體
收到細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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