詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺小動脈 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X8494 |
細胞簡介:
小鼠肺小動脈內(nèi)皮分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側(cè),至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,分兩支進入左肺的上、下葉。右肺動脈較長,橫行向右,經(jīng)主動脈升部和上腔靜脈的后方達右肺門,分3支進入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支,與支氣管的分支伴行,后達肺泡壁,形成稠密的毛細血管網(wǎng)。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側(cè)與主動脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索,稱動脈韌帶。管徑在0.3~1mm之間,為小動脈(small-artery),小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。口徑在1mm以下的動脈,管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。支配小動脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維,可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細胞。在毛細血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富。肺小動脈內(nèi)皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺小動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠肺小動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳1-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠肺小動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
蔗糖測定試劑盒(紫外比色法)
γ-谷酰半胱酸合成酶(γ-GCS)測定試劑盒(速率法)
超微量ATP酶測試盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)
總巰基(-SH)測定試劑盒
MAP激酶相互作用絲/蘇激酶1抗體
FBXL18蛋白抗體
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Recepto僀?僀
chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA 試劑盒
Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗體(ANF)試劑盒
Porcineadiponectin,ADPELISAKit 豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒分裝
CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM
血液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50次
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒
小鼠肺小動脈內(nèi)皮細胞大鼠鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)試劑盒 ,英文名: CAMK2α ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒
RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝
CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽
細胞培養(yǎng)液抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?span>(HD)試劑盒