化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
動脈 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8507 |
細胞簡介：
小鼠頸動脈平滑肌分離自頸動脈組織；頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。在發(fā)生時，鰓弓中不形成鰓的下頜弓，所以，從大動脈也不分入鰓動脈和出鰓動脈。從腹大動脈的前方發(fā)出頸外動脈，頸內(nèi)動脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的，但在某些魚類、有尾兩棲類和爬行類中，這一血管也將一些血液送至大動脈根。其它的高等脊椎動物的大動脈根，在第三、第四大動脈弓之間消失，所以，其第三大動脈弓形成純粹的頸動脈。在相當于第三、第四大動脈弓之間的腹行大動脈的部分稱為頸總動脈干（common co-rotid trunk）；高等脊椎動物，是由頸總動脈干分為左、右頸總動脈，然后再各分支為頸外動脈和頸內(nèi)動脈。頸動脈是將血液由心臟輸送至頭、面、頸部的大血管，是腦的主要供血血管之一，由內(nèi)膜、平滑肌層及外膜層構(gòu)成。與其相關常見疾病為頸動脈狹窄，頸動脈狹窄導致的缺血癥狀主要包括，頭暈、記憶力、定向力減退、意識障礙、黑朦、偏側(cè)面部和/或肢體麻木和/或無力、伸舌偏向、言語不利、不能聽懂別人說的話等。研究頸動脈平滑肌細胞的體外培養(yǎng)，為研究治療頸動脈狹窄提供一個細胞模型具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠頸動脈血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的小鼠頸動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠頸動脈血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
土壤堿性蛋白酶 可見分光光度法 50管/24樣
FDA水解酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
土壤酸性蛋白酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
土壤漆酶測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Intersectin 2抗體
高遷移率族蛋白2重組兔單克隆抗體
PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原
TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein
IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)
SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原
IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)
PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白
TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein
小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA pcr檢測試劑盒
Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)試劑盒
Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受體(AR)pcr檢測試劑盒分裝
Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CK2α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanproteinkinaseC，PKCELISAKit人蛋白激酶C(PKC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠頸動脈血管平滑肌細胞大鼠垂草扁桃酸(VMA)試劑盒 ，英文名： VMA ELISA Kit
Mouse 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)試劑盒
ELISA 小鼠環(huán)0酸鳥苷(mouse cGMP) 分裝
CLIAKitforLF/LTFAb-Ig(HumanLactoferrinaibodyIgG)ELISAkit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG
通用型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次
ELISAKitCollagenaseI膠原酶I
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網(wǎng)