Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板對(duì)比哪個(gè)更靠譜
閱讀:667 發(fā)布時(shí)間:2020-10-20
Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀有多重要?
這個(gè)答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。
畢竟我們都曾經(jīng)歷過(guò),花了一整天的時(shí)間制備細(xì)胞、染色、分選,進(jìn)行一個(gè)精密計(jì)劃的實(shí)驗(yàn),結(jié)果卻因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)細(xì)胞量卻不夠而被迫結(jié)束。
如今圈子里常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板,然而隔壁實(shí)驗(yàn)室的小明都在用自動(dòng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀了。
但一些只相信所見(jiàn)即所得的小伙伴,對(duì)于自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)仍舊不太信任,因此今天體貼如我就為大家比對(duì)一下Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。
對(duì)比1:準(zhǔn)確度
主觀差異性
不論采用哪種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,依靠操作人員的判斷都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出錯(cuò)。
Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用了*的算法來(lái)確定焦距和光強(qiáng)度;可去除諸多主觀變量,同時(shí)還可節(jié)省時(shí)間。利用定量方法,根據(jù)細(xì)胞大小、亮度和圓度對(duì)細(xì)胞進(jìn)行設(shè)門,而不是依靠操作人員的判斷,這有助于減少主觀性錯(cuò)誤,提高樣本和用戶間的重復(fù)性。
取樣數(shù)量
實(shí)際上,許多研究人員無(wú)法計(jì)數(shù)足夠的細(xì)胞,這會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果不可靠,且標(biāo)準(zhǔn)差高。為了在手動(dòng)計(jì)數(shù)過(guò)程中節(jié)省時(shí)間,許多用戶只對(duì)傳統(tǒng)的血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格中的一個(gè)或兩個(gè)方格進(jìn)行計(jì)數(shù)。
計(jì)數(shù)更多方格(即更大的面積)一般會(huì)提高結(jié)果的一致性,但需要耗費(fèi)更多時(shí)間。
Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀僅需10秒即可分析相當(dāng)于近4個(gè)傳統(tǒng)血球計(jì)數(shù)板的方格,降低了細(xì)胞分布差異效應(yīng),提高了計(jì)數(shù)結(jié)果的一致性。
面積:2.15mmx1.62mm(3.48mm2)
細(xì)胞團(tuán)塊計(jì)數(shù)
采用手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)方法及一些自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)含有細(xì)胞團(tuán)塊的樣本,很難獲得準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)結(jié)果。計(jì)數(shù)細(xì)胞團(tuán)塊面臨的常見(jiàn)挑戰(zhàn)是區(qū)分細(xì)胞間的邊界,確定團(tuán)塊中的細(xì)胞數(shù)量。一些自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀無(wú)法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)只含五個(gè)甚至更少細(xì)胞的團(tuán)塊。CountessII儀器采用了*的計(jì)數(shù)算法,可以明確地鑒別復(fù)雜細(xì)胞團(tuán)塊中的細(xì)胞邊界,從而獲得準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。
熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)
流式細(xì)胞儀及采用血球計(jì)數(shù)板和顯微鏡進(jìn)行手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)是熒光蛋白表達(dá)分析的金標(biāo)準(zhǔn),但這兩種方法都需要高級(jí)用戶培訓(xùn)和相對(duì)昂貴的儀器。Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能夠提供相當(dāng)準(zhǔn)確的熒光細(xì)胞計(jì)數(shù),包含兩個(gè)可選的用戶可更換的熒光通道。采集的顏色取決于光立方;有超過(guò)20種光立方可供選擇。
對(duì)比2:成本
研究人員不愿意采用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的主要原因在于,自動(dòng)化系統(tǒng)需要采用的一次性載玻片,這會(huì)帶來(lái)長(zhǎng)期成本。
Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可支持可重復(fù)使用的玻璃載玻片,大大降低了成本,但也可以使用方便的一次性載玻片。這一經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的創(chuàng)新設(shè)計(jì)使得實(shí)驗(yàn)室能夠采用這種出眾的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,且無(wú)需負(fù)擔(dān)其他自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的耗材成本。
對(duì)比3:節(jié)省時(shí)間
采用Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)(10秒)相比手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)(至少5分鐘)節(jié)省的時(shí)間成本常被忽視。如果每天計(jì)數(shù)5塊載玻片(每片2個(gè)樣本),轉(zhuǎn)換至使用可重復(fù)使用的載玻片的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,每個(gè)月可節(jié)省約10個(gè)小時(shí)。當(dāng)使用一次性載玻片時(shí),每個(gè)月節(jié)省的時(shí)間可達(dá)約15小時(shí)。這些時(shí)間可用于完成實(shí)驗(yàn)室的其他工作,因此從手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)切換至自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的優(yōu)勢(shì)明顯。
對(duì)比4:結(jié)果
采用血球計(jì)數(shù)板獲得的信息僅限于樣本中的總細(xì)胞數(shù)、活細(xì)胞數(shù)和死細(xì)胞數(shù)。自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀還可以獲得的數(shù)據(jù)包括平均細(xì)胞大小以及基于熒光強(qiáng)度或活細(xì)胞和死細(xì)胞大小的細(xì)胞分布直方圖。Curiosis細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器,可將采集的信息保存為CSV文件,保存至USB驅(qū)動(dòng)器上供進(jìn)一步分析。原始圖像及結(jié)果界面均可保存至USB驅(qū)動(dòng)器并傳輸至計(jì)算機(jī)上。