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一、免疫磁珠法分離細(xì)胞原理

免疫磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合，在外加磁場(chǎng)中，通過(guò)抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場(chǎng)中，無(wú)該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒(méi)有磁性，不在磁場(chǎng)中停留，從而使細(xì)胞得以分離。

二、MACS微珠（MicroBeads）

MACS微珠是一種與高度特異性單克隆抗體相偶聯(lián)的超順磁化微粒，用于目的細(xì)胞分離或者去除細(xì)胞的磁性標(biāo)記。微珠直徑約有50nm，比細(xì)胞小200多倍，體積為細(xì)胞的百萬(wàn)分之一，光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)。微珠由多聚糖和氧化鐵組成，無(wú)毒性，對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷，可以生物降解。MACS微珠與流式細(xì)胞儀兼容，不會(huì)影響細(xì)胞的光散射特性；磁性標(biāo)記只占用20－30％的結(jié)合位點(diǎn)，不影響細(xì)胞的熒光抗體標(biāo)記。此外，MACS微珠可以大限度地避免細(xì)胞活化；無(wú)需解離磁珠，可以直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)：如流式細(xì)胞儀分析或分選、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)研究、回輸給人或者動(dòng)物。

MACS微珠主要有三種：直標(biāo)微珠、間標(biāo)微珠、多選微珠。其中間標(biāo)微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠。多選微珠是專門(mén)為分選細(xì)胞亞群而研制的一種微珠。這種微珠通過(guò)特殊的方式與抗體偶聯(lián)，在一次陽(yáng)性分選完成后，與細(xì)胞結(jié)合的多選微珠可以被解離試劑剪切下來(lái)，陽(yáng)性分選的細(xì)胞可以進(jìn)行再次陽(yáng)性分選或者去除分選。

三、MACS分選柱（Separation Column） 

MACS分選柱是一類填充有不同規(guī)格鐵珠的塑料容器，鐵珠表面有親水包被，因此不會(huì)損傷細(xì)胞。在磁場(chǎng)外MACS分選柱不帶有磁性，但是當(dāng)置于一個(gè)磁場(chǎng)—MACS分選器中時(shí)，分選柱內(nèi)的鐵珠可以使分選器的磁場(chǎng)增強(qiáng)1000倍，足以滯留僅標(biāo)記有極少量微珠的目的細(xì)胞；磁性標(biāo)記細(xì)胞從分選柱中通過(guò)時(shí)可以受到均勻的磁力作用，從而提高分選純度和回收率。手動(dòng)操作在30分鐘內(nèi)可完成，自動(dòng)分選僅需2.5-10分鐘，得到的細(xì)胞可立即用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。此外，大多數(shù)MACS分選柱都是無(wú)菌包裝，一次性使用，可以滿足細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)菌條件。

 

四、MACS分選器（MACS Separators） 

MACS分選器由磁鐵和支架構(gòu)成。與分選柱一起組成高強(qiáng)度的梯度磁場(chǎng)。根據(jù)應(yīng)用范圍分為研究用和臨床應(yīng)用的MACS分選器，根據(jù)操作方式分為手動(dòng)和自動(dòng)分選器。

1、MiniMACS分選器和OctoMACS分選器

MiniMACS分選器是專為手動(dòng)分選動(dòng)、植物細(xì)胞，細(xì)菌、病毒、細(xì)胞器和mRNA等分子而設(shè)計(jì)的。該設(shè)備價(jià)格低廉，快速分選，應(yīng)用廣泛，易于操作，是獲得少量高純度細(xì)胞的理想設(shè)備。OctoMACS分選器把8個(gè)MiniMACS分選器連在一起，可以在一臺(tái)儀器上同時(shí)進(jìn)行8個(gè)標(biāo)本的分選。

  
 2、MidiMACS分選器和QuadroMACS分選器

MidiMACS分選器是MiniMACS分選器的擴(kuò)大版本，與LS和LD分選柱配合使用，可陽(yáng)性選擇或者去除大量高純度細(xì)胞。QuadroMACS分選器把4個(gè)MidiMACS分選器連在一起，可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)分選過(guò)程，或者同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣本分選，也可將一個(gè)大的樣本分成數(shù)個(gè)部分同時(shí)分選。

 

3、VarioMACS分選器

VarioMACS分選器有多種適配器，可以使用MS、LS、LD和CS分選柱?？捎糜陉?yáng)性選擇和去除分選：既可高純度地分選出稀有細(xì)胞，也可用來(lái)從細(xì)胞懸液中去除多達(dá)2×108非目的細(xì)胞。