詳細(xì)介紹
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
小鼠上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng) : Mouse E-Cad elisa kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織、等其他相關(guān)生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域: 僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于臨床診斷,使用前請(qǐng)認(rèn)真閱讀說(shuō)明書(shū)
保存條件:2~8℃,有效期6個(gè)月。
小鼠上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前的注意事項(xiàng)
為了幫助您更好地解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問(wèn)題,我們?cè)O(shè)計(jì)了這些問(wèn)題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說(shuō)明書(shū)一起供您參考使用。很多因素都將導(dǎo)致免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)的失敗,而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過(guò)全面閱讀和準(zhǔn)確理解說(shuō)明書(shū)以及實(shí)驗(yàn)步驟來(lái)避免的。若對(duì)試劑盒內(nèi)的說(shuō)明書(shū)有任何意見(jiàn)和建議,歡迎反饋。我們期待聽(tīng)到您的聲音,從而完善我們的產(chǎn)品,更好地為您服務(wù)。
◆ 仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
◆ 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過(guò)有效期,請(qǐng)勿使用。
◆ 按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
◆ 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
◆ 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品, (比如移液器,試管,清洗器, 酶標(biāo)儀)
◆ 按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)推薦的條件存儲(chǔ)。
問(wèn) 題 | 可能的原因 | 解決方法 |
1.非常弱的結(jié)果 | (1)溫育的時(shí)間或溫度不夠;(2)顯色反應(yīng)時(shí)間太短;(3)所用配制緩沖液的蒸餾水有問(wèn)題;(4)加入抗體/酶的稀釋液濃度太低;(5)酶標(biāo)儀濾光片不正確;(6)不正確的試劑儲(chǔ)存方式;(7)試劑盒沒(méi)有充分平衡;(8)移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔。 | 校正溫育箱溫度;校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí);使用新鮮合格的蒸餾水;按照說(shuō)明書(shū)保存試劑盒和準(zhǔn)確配制工作液;試劑室溫平衡至少 20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃);校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,最好一次性使用。 |
2.標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差 | 這是典型的由測(cè)定操作引起的問(wèn)題,包括(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;(2)加樣過(guò)快,孔間發(fā)生污染;(3)加錯(cuò)樣本;(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);(5)不同批號(hào)試劑盒中組分混用;(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;(7)孔內(nèi)污染雜物;(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確;(9)試劑/樣品沒(méi)有混勻;(10)血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)等。 | 重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與第一次接近;重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應(yīng)充分混勻;盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。 |
3.白板(陽(yáng)性對(duì)照不顯色) | (1)漏加酶結(jié)合物;(2)洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等;(3)添加的試劑錯(cuò)誤或者被遺漏;(4)試劑過(guò)期; | 請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數(shù)配制;注意不要漏加;每次加液前均應(yīng)核對(duì)標(biāo)簽。 |
4.空白背景高 | (1)洗板不干凈;(2)顯色液變質(zhì);(3)試劑過(guò)期;(4)不正確的試劑稀釋液,如加酶的濃度過(guò)高; | 濃縮洗液準(zhǔn)確配制;50 倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋?zhuān)怀浞窒礈欤?拍干;加樣或加酶拍板 |
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