詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:輔酶ⅠNAD(H)含量檢測試劑盒
別名:輔酶ⅠNAD(H)含量檢測試劑盒
英文名稱:NAD/NADH Quantitation Kit
檢測方法:微量法(酶標(biāo)儀檢測)
貨期:現(xiàn)貨
儲存條件:2-8°C or -20°C
測定意義:
輔酶I NAD(H) 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NAD+ 是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)的主要?dú)涫荏w,生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD(H) 含量和NADH/NAD+ 比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H) 及NADH/NAD+ 比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態(tài)。此外,NADH/NAD+ 比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,NAD+ 降解產(chǎn)物對細(xì)胞信號傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測定原理:
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+ 和NADH,NADH通過P微量試劑盒的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+ 可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水