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MRMplus Retention Time Marker貨號：FMR-002

MRMplus保留時間標(biāo)記是標(biāo)記肽(12種合成肽)的混合物，用于計(jì)算LC-MS/MS系統(tǒng)中LC的保留時間，以進(jìn)行scheduled-MRM。通過使用該標(biāo)記和轉(zhuǎn)換軟件，可以容易地轉(zhuǎn)換每個MRMplus標(biāo)準(zhǔn)肽的片段值。
 

成分
 

*將1 l儲備溶液稀釋到199 l樣品稀釋劑中，作為液相色譜系統(tǒng)的工作溶液。當(dāng)您使用TFA作為樣品稀釋劑時，建議使用grass安瓿型產(chǎn)品(如賽默飛公司的#28902)。工作溶液應(yīng)儲存在4°C下

注意:避免儲備溶液的凍融循環(huán)

注意:請?jiān)谝恢軆?nèi)使用工作液



總議定書

*該協(xié)議針對QTRAP5500系統(tǒng)(nanoESI，ABSciex)進(jìn)行了優(yōu)化。對于其他LC-MS/MS系統(tǒng)，最佳條件應(yīng)由用戶確定。

1. 將0.2升工作溶液注入液相色譜。
2. 優(yōu)化液相色譜條件和進(jìn)樣量。
3. 輸入12種標(biāo)記肽的Q1和Q3值，并在沒有調(diào)度功能的情況下進(jìn)行MRM分析。
4. 將檢測到的12種標(biāo)記肽的保留時間寫在電子表格中。
5. 使用檢測到的保留時間和轉(zhuǎn)換軟件(RTimeToSegment.exe ),將目標(biāo)蛋白質(zhì)的內(nèi)標(biāo)肽段值轉(zhuǎn)換為預(yù)期保留時間。
6. 將預(yù)期保留時間輸入LC-MS/MS系統(tǒng)。
7. 為1 g樣品混合1 l保留時間標(biāo)記，然后加入適量的內(nèi)標(biāo)肽。用樣品稀釋劑將混合物稀釋至10 l，使用2 l進(jìn)行預(yù)定的MRM分析。

注意:您應(yīng)該為計(jì)劃設(shè)置一個大范圍的預(yù)期保留時間，否則您將錯過目標(biāo)肽。

注意:根據(jù)您的液相色譜條件，如梯度、使用的色譜柱或室溫，一些標(biāo)記肽可能彼此非常接近，或者有時會互換。

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