Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑在細(xì)胞轉(zhuǎn)染、細(xì)胞識(shí)別、抗體蛋白研發(fā)等領(lǐng)域廣泛使用，通?？梢灾苯淤徺I或者過實(shí)驗(yàn)室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸鈣、是較為常見的轉(zhuǎn)染試劑，其實(shí)目前市場上的轉(zhuǎn)染試劑盒針對某些轉(zhuǎn)染進(jìn)行了優(yōu)化，使用起來較為方便。
由于省掉了電轉(zhuǎn)杯，轉(zhuǎn)染過程也更為簡化：只需將細(xì)胞和核酸吸入Neon移液器吸頭中，再插入到移液器吸頭架上，并按“Start”即可。轉(zhuǎn)染過后，直接將細(xì)胞加入培養(yǎng)容器中。既沒有繁瑣的移液，也不需要清洗電轉(zhuǎn)杯。而且，通用的試劑盒適用于所有細(xì)胞類型，不用購買多個(gè)試劑盒，也無需鑒定最佳緩沖液。當(dāng)然，一次性使用的24K金電極吸頭成本不低。因多次使用會(huì)導(dǎo)致金包被變薄，改變吸頭的電導(dǎo)率，所以每個(gè)吸頭最多只能使用兩次。
使用Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑需要注意什么？
1、轉(zhuǎn)染操作時(shí)，以細(xì)胞融合度達(dá)90%-95%為佳；
2、使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率；
3、制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑；
4、轉(zhuǎn)染的時(shí)候培養(yǎng)基中不能添加抗生素；
5、試劑應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長時(shí)間開蓋；
6、初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3。
轉(zhuǎn)染后需要進(jìn)行終止嗎？
不需要。脂質(zhì)體復(fù)合物可以穩(wěn)定存在6個(gè)小時(shí)。如果在進(jìn)行轉(zhuǎn)染前沒有進(jìn)行細(xì)胞換液，為了保證細(xì)胞正常生長所需的營養(yǎng)，需要在4～6小時(shí)后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進(jìn)行過換液，則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要進(jìn)行再次換液。
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