全自動菌落計數(shù)儀因其使用的自動化程度高、分析結(jié)果可核對、樣品信息可留存等,已逐漸被越來越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛。
如何選型,才能獲得性能較好的菌落計數(shù)儀,并取得高性價比呢?這得從該類儀器的原理來解釋。現(xiàn)今面市的所有全自動菌落計數(shù)儀均是采用成像分析法實現(xiàn)自動計數(shù)的,即由成像硬件+分析軟件所組成,這二塊內(nèi)容的任何一塊上出現(xiàn)失分,都會嚴重影響計數(shù)分析結(jié)果的穩(wěn)定性。
一、成像硬件的選型
成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像,以便分析計數(shù)?,F(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點是:成像速度快,能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機、卡片機拍照成像的優(yōu)點是:能自動對焦、且像素分辨率一般更高,但其成像需要3~4秒的時間。
然而,拍照成像的致命弱點是:成像環(huán)境中的光線強度,無論是暗視野,還是背光,想要做到圖像中心與邊緣保持*一致,相對來說比較困難。從而引起平皿上亮度的不一致。
針對環(huán)境光干擾成像方面,通過對儀器照明系統(tǒng)進行精密的設(shè)計,上下光源采用了寬光帶的LED柔光系統(tǒng),并結(jié)合"懸浮式暗視野"成像系統(tǒng),不僅能夠消除玻璃培養(yǎng)皿的折射光斑,而且通過改變光比,使得菌落表面的皺折、凹陷、邊緣的鋸齒更富立體感。
掃描成像與在燈箱中營造均勻面光源不同,是將線光源通過移動變成面光源的,光線強度相對比較均勻,其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個數(shù)量級,從成像硬件的上解決了菌落目標的亮度不勻問題,但掃描只是平面的效果,不能展現(xiàn)培養(yǎng)基表層和深層的細微菌落,且不能展現(xiàn)菌落顏色等多方面的情況,對于觀察分析而言構(gòu)成了一定難度。
二、分析軟件的選型
分析軟件是全自動菌落計數(shù)儀 的另一塊核心成分。因為菌落生物的存在多樣性,在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致,針對這類變化,在分析軟件選型上要考慮:對于各類成像干擾的自動排出能力。
比如:是否能自動矯正背景,等等。另外,對于嚴重粘連在一起的團裝、鏈狀分布菌落,將其自動分割開來的水平,也是評價分析軟件的考量指標。尤其是:對于同類菌落的"一鍵"化的智能分類計數(shù)能力,以及對于菌落計數(shù)分類的自動識別學習能力,更是評價分析軟件的關(guān)鍵考量指標。
現(xiàn)在比較好的分析軟件,具有圖像處理、圖像編輯、統(tǒng)計功能、測量功能、數(shù)據(jù)庫管理、以及對抗生素效價分析、藥敏分析功能、多培養(yǎng)皿統(tǒng)計、螺旋平皿統(tǒng)計等一系列功能。
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