艱難梭菌（Clostridium difficile）對氧極為敏感，分離培養(yǎng)較困難．故命名為艱難梭菌。 艱難梭菌屬厭氧性細(xì)菌。厭氧性細(xì)菌是指那些在無氧條件下要比在有氧環(huán)境中生長好的細(xì)菌，而人的腸道正好是一個相對無氧的環(huán)境。
供微生物所艱難梭菌檢測試劑（酶聯(lián)法）

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供微生物所艱難梭菌檢測試劑（酶聯(lián)法）

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供微生物所艱難梭菌檢測試劑（酶聯(lián)法）

 測試原理：

CoproELISA^Tm 值C。艱難梭菌 GDH 是一種用于檢測人類糞便中 GDH的酶免疫測定法。

• 分裂的微孔用艱難梭菌 GDH 特異性單克隆抗體包被。
• 將辣根過氧化物酶（HRP）綴合的單克隆抗 GDH 抗體加入到抗體包被的微孔中。
• 將糞便樣品稀釋在樣品稀釋劑中并加入微孔中。在該步驟中，艱難梭菌 GDH 由 HRP 綴合的抗體標(biāo)記并通過包被的抗體固定。
• 通過洗滌除去未結(jié)合的綴合物。
• 加入 TMB-底物，底物被過氧化物酶水解，得到還原底物的藍(lán)色溶液。
• 加入終止溶液后，藍(lán)色變?yōu)辄S色，應(yīng)由 ELISA 讀數(shù)器在450 / 620nm 波長下讀取。
• 吸光度與艱難梭菌的水平成比例樣品中的 GDH。

A. 試劑的制備

• 將所有組件和臨床樣本進(jìn)行測試，使其達(dá)到室溫。確定要

測試的樣本總數(shù)。除了標(biāo)本外，每次測試還必須包括以下內(nèi)容：負(fù)控制的一個孔（用于此目的的樣品稀釋劑）和一個陽性對照孔。

• 通過在密封附近切割一端將微量滴定板從鋁袋中取出。在

96 孔框架中留下所需數(shù)量的條帶（根據(jù)待測樣品的數(shù)量）。

3. 用雙去離子水或蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液 1/20。例如， 為了制備 1 升洗滌緩沖液，將 50ml 濃縮洗滌緩沖液加入950ml 雙去離子水或蒸餾水中。

B. 樣品處理

• 為每個待測樣品設(shè)置一個稀釋管。

為此，建議使用 1.5 毫升 Eppendorf 管。向每個管中加入200μl 樣品稀釋劑。標(biāo)記管。

5. *混合（渦旋）糞便樣本以確保充分采樣。

• 成型樣品：使用木制涂抹棒或一次性茶匙將糞便樣品轉(zhuǎn)移

到管中。將約 0.05 至 0.1g 樣品（約 3mm 直徑）轉(zhuǎn)移至樣

品稀釋劑。將樣品稀釋劑中的收集器混合以除去盡可能多 的樣品，并將收集器擠壓在管的側(cè)面以表達(dá)任何殘留液體。液體樣品：將 50μl 樣品轉(zhuǎn)移到管中。確保液體樣本均勻懸

浮（渦旋）。

• 將稀釋的樣品保存在 2?到 8?C 之間，直到進(jìn)行測試。

 中文版說明書由健侖生物技術(shù)人員翻譯，具體以英文原版為準(zhǔn)。

 

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