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醫(yī)療部研究艱難梭菌測定試劑盒（ELISA）
廣州健侖生物科技有限公司
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醫(yī)療部研究艱難梭菌測定試劑盒（ELISA）
測試原理：
CoproELISATm 值C。艱難梭菌 GDH 是一種用于檢測人類糞便中 GDH的酶免疫測定法。
- 分裂的微孔用艱難梭菌 GDH 特異性單克隆抗體包被。
- 將辣根過氧化物酶（HRP）綴合的單克隆抗 GDH 抗體加入到抗體包被的微孔中。
- 將糞便樣品稀釋在樣品稀釋劑中并加入微孔中。在該步驟中，艱難梭菌 GDH 由 HRP 綴合的抗體標記并通過包被的抗體固定。
- 通過洗滌除去未結合的綴合物。
- 加入 TMB-底物，底物被過氧化物酶水解，得到還原底物的藍色溶液。
- 加入終止溶液后，藍色變?yōu)辄S色，應由 ELISA 讀數器在450 / 620nm 波長下讀取。
- 吸光度與艱難梭菌的水平成比例樣品中的 GDH。
A. 試劑的制備
- 將所有組件和臨床樣本進行測試，使其達到室溫。確定要
測試的樣本總數。除了標本外，每次測試還必須包括以下內容：負控制的一個孔（用于此目的的樣品稀釋劑）和一個陽性對照孔。
- 通過在密封附近切割一端將微量滴定板從鋁袋中取出。在
96 孔框架中留下所需數量的條帶（根據待測樣品的數量）。
3. 用雙去離子水或蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液 1/20。例如， 為了制備 1 升洗滌緩沖液，將 50ml 濃縮洗滌緩沖液加入950ml 雙去離子水或蒸餾水中。
B. 樣品處理
- 為每個待測樣品設置一個稀釋管。
為此，建議使用 1.5 毫升 Eppendorf 管。向每個管中加入200μl 樣品稀釋劑。標記管。
5. *混合（渦旋）糞便樣本以確保充分采樣。
- 成型樣品：使用木制涂抹棒或一次性茶匙將糞便樣品轉移
到管中。將約 0.05 至 0.1g 樣品（約 3mm 直徑）轉移至樣
品稀釋劑。將樣品稀釋劑中的收集器混合以除去盡可能多 的樣品，并將收集器擠壓在管的側面以表達任何殘留液體。液體樣品：將 50μl 樣品轉移到管中。確保液體樣本均勻懸
?。u旋）。
- 將稀釋的樣品保存在 2?到 8?C 之間，直到進行測試。
中文版說明書由健侖生物技術人員翻譯，具體以英文原版為準。
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什么是艱難梭菌？
艱難梭菌是一種嚴格的條件致病菌，也就是說，常規(guī)的厭癢環(huán)境培養(yǎng)艱難梭菌無法生長，必須在*的厭氧環(huán)境下才能培養(yǎng)出艱難梭菌。艱難梭菌常發(fā)病于院內感染，通常是病人大量使用抗生素引起的條件性感染，住院病人大量使用氨芐西林、喹諾酮類藥物引起腸道菌群失調，從而艱難梭菌大量生長繁殖，繼而出現偽膜性腸炎和抗生素相關性腹瀉癥狀的臨床表現。腸道菌群失調，艱難梭菌大量繁殖產生細菌毒素，破壞腸黏膜，導致腸粘膜壞死，且出現水樣腹瀉，或者是棕褐色的腹瀉，治療上補充水、電解質，防止平衡紊亂，可以口服萬古霉素，或者是靜脈注射抗物萬古霉素。所以說艱難梭菌，重要的不是在于治療，而是在預防，也就是在醫(yī)院治療時需要根據敏感的細菌選用抗生素，防止抗生素濫用導致艱難梭菌的生長繁殖引起院內感染。
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